小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的培養(yǎng)條件與注意事項及打管說明!
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌為革蘭氏陰性桿菌或球桿菌,大小為1-3.5×0.5-1.3μm,多單個散在,有時排列成短鏈或成堆。本菌不形成芽胞,無莢膜,有周鞭毛;但其鞭毛在30℃以下培養(yǎng)條件形成,溫度較高時即喪失,因此表現(xiàn)為30℃以下有動力,而35℃以上則無動力。
一、菌種簡介
平臺編號:Bio-57143
提供形式:凍干物
拉丁屬名:Yersinia Enterocolitica
中文名稱:小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
屬名:Yersinia
種名加詞:enterocolitica
其它中心編號:=CMCC (B) 52204
來源歷史:←CMCC
收藏時間:2014.5.26
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究
具體用途:研究、質(zhì)量控制
特征特性:G-球桿菌,有動力,鳥氨酸脫羧酶、尿素酶、V-P試驗均陽性,發(fā)酵山梨醇、蔗糖、甘露醇,不發(fā)酵棉子糖、鼠李糖。血清型為4群4,32型。
生物危害程度:三類
致病對象:人
培養(yǎng)基:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4.H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
培養(yǎng)溫度:36℃
資源保藏類型:培養(yǎng)物
保存方法:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
實物狀態(tài):有實物
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
用途:研究;研究、質(zhì)量控制
注意事項:僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)
二、儲存條件
凍干菌種和試管斜面請置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌種請置于-20℃冷凍。
三、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基編號:CM0002
2、培養(yǎng)基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入 5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
3、需氧類型:好氧
4、培養(yǎng)溫度:36℃
四、注意事項
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時間:細菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、試管斜面菌種請盡快轉(zhuǎn)接,不建議長期存放。
3、初次使用時請按照本說明書推薦條件進行復活培養(yǎng),如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負責任。
4、使用者應保證菌種的安全存儲和操作,帶菌廢棄物應高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站。
五、凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉檫試凍干管表面進行消毒,將管頂端于酒精燈外焰上均勻加熱;立即滴 2-3 滴無菌水于加熱部位,使管壁破裂;再用鑷子或其他適宜工具敲下破裂處。
2、菌株恢復培養(yǎng):用無菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于凍干管中將凍干菌粉全部溶解。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻,并取 100μL 轉(zhuǎn)接到固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在 2-8℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,需要轉(zhuǎn)接至 2-3 代恢復活力。
4、復蘇后的菌種在傳 1-2 代后使用。
5、暫不啟開的安瓿管應于 4℃中保藏(特殊除外)。
6、凍干管打開后需一次用完,不能留存。
7、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應的防護設(shè)備中進行,生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作,打管時凍干管應遠離面部,保護眼睛。
8、打管操作應在燒杯或托盤上方進行,用完凍干管應滅菌處理后丟棄。
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