手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
蛋白純化填料的制備技術已經(jīng)相對成熟，能夠實現(xiàn)大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。無論是在實驗室規(guī)模的小量蛋白質(zhì)純化研究，還是在大型生物制藥企業(yè)中的大規(guī)模蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)，都可以根據(jù)實際需求選擇合適的填料規(guī)格和數(shù)量，滿足不同層次的純化需求，并且能夠保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
蛋白純化填料的基本工作原理：
(一)基于電荷相互作用
許多蛋白純化填料帶有特定的電荷基團，例如陰離子交換填料攜帶負電荷，陽離子交換填料攜帶正電荷。在一定的緩沖液條件下，蛋白質(zhì)分子根據(jù)其自身所帶電荷的性質(zhì)與填料發(fā)生靜電吸附。當緩沖液的離子強度或 pH 值改變時，蛋白質(zhì)與填料之間的電荷吸引力減弱，從而使目標蛋白質(zhì)被洗脫下來，而雜質(zhì)蛋白由于電荷性質(zhì)差異或與填料結合力不同而留在柱上或在不同洗脫條件下被分離。
(二)基于疏水相互作用
疏水性蛋白純化填料表面具有疏水基團，蛋白質(zhì)分子中也存在疏水區(qū)域。在高鹽濃度環(huán)境下，蛋白質(zhì)的疏水區(qū)域會與填料的疏水基團相互靠近并通過疏水相互作用結合。隨著鹽濃度降低，這種疏水相互作用減弱，目標蛋白質(zhì)得以洗脫，從而實現(xiàn)蛋白質(zhì)的純化。這種基于疏水作用的純化方式對一些膜蛋白等疏水性較強的蛋白質(zhì)純化較為有效。
(三)基于親和特異性
親和層析填料是利用蛋白質(zhì)與特定配體之間的高度特異性親和力來實現(xiàn)純化的。例如，酶與其底物、抑制劑，抗體與抗原等之間存在特異性的親和關系。將相應的配體固定在填料上，當含有目標蛋白質(zhì)的樣品通過時，目標蛋白質(zhì)會特異性地與配體結合，而其他雜質(zhì)蛋白則不被吸附或吸附較弱。通過改變洗脫條件，如使用含有競爭性配體或改變緩沖液成分等方法，可以使目標蛋白質(zhì)從填料上解吸附并被收集，從而達到高度純化的目的。
(四)基于分子篩原理
分子篩型蛋白純化填料具有特定孔徑大小的多孔結構。當?shù)鞍踪|(zhì)混合液通過填料時，較小分子量的蛋白質(zhì)能夠進入填料的孔隙內(nèi)部，而較大分子量的蛋白質(zhì)則被排斥在外。在洗脫過程中，小分子量蛋白質(zhì)由于在孔隙內(nèi)擴散路徑較長，洗脫速度相對較慢；大分子量蛋白質(zhì)則較快地被洗脫出來，從而根據(jù)分子量大小實現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離純化。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的，應在授權范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心