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紫外可见分光光度计是分析化学中的重要工具，其使用细节直接影响数据的准确性和仪器寿命。以下从使用前准备、校准与测量操作、环境控制、日常维护等方面展开，阐述其关键细节。
一、使用前准备
1. 仪器预热与自检：
- 开机前需确保电源接地良好，并检查样品室是否存在遗留的防潮剂或杂物。
- 预热时间因型号而异，一般为15-30分钟，以确保光源稳定和仪器自检完成。
2. 环境条件控制：
- 温度：建议保持在5-35℃，避免仪器内部过热加速元件老化。
- 湿度：需低于85%，高湿度易导致光学部件发霉、金属部件锈蚀。
- 防尘与腐蚀气体：避免实验室环境中存在腐蚀性气体或过多尘埃，定期清洁仪器表面及样品室。
二、校准与测量操作
1. 波长校准与零点校正：
- 使用空白溶液(如溶剂或参比液)进行零点校准，确保吸光度归零(0.000A)或透光率满度(100%T)。
- 手动设置波长时需匹配样品的吸收峰，避免波长漂移导致误差。
2. 测量操作步骤：
- 装入比色皿：选择石英材质用于紫外区(190-400nm)，玻璃或塑料材质适用于可见光区。
- 空白校正：将参比溶液推入光路，按“AUTO-ZERO”或“100%T”键，直至显示100%T或0.000A。
- 样品测试：更换待测样品，记录吸光度或透光率值，需确保比色皿外壁无液滴残留。
三、样品与比色皿处理
1. 比色皿选择与清洁：
- 紫外区需用石英比色皿，可见区可选用玻璃或塑料材质。
- 测量前后需用蒸馏水冲洗比色皿，若有残留可用无水乙醇浸泡，禁用粗糙纸张擦拭以免划伤。
2. 样品制备：
- 吸光度应控制在0.1-1.0范围内，浓度过高可能导致光源饱和，过低则信号弱。
- 避免样品与比色皿内壁接触，必要时用移液器精确稀释。
四、环境干扰与维护
1. 减少振动与温度波动：
- 仪器需放置于平稳台面，避免震动导致灯丝断裂或光路偏移。
- 内置温控系统的仪器仍需注意环境温度变化，建议实验室配置恒温设备。
2. 定期维护与故障处理：
- 清洁光学系统：定期用擦镜纸清洁透镜，检查光路是否偏移，必要时由工程师校准。
- 更换光源：氘灯(紫外区)和钨灯(可见区)需按厂商建议周期更换，避免亮度衰减影响数据。
- 除湿处理：若仪器受潮，可用电吹风低温干燥光电管暗盒，并更换干燥剂。
五、常见问题与应对
1. 透光率无法调至100%：检查光源是否老化或波长校准偏差，需重新调整或更换灯泡。
2. 测量重复性差：可能因环境温度波动、比色皿污染或仪器未充分预热，需逐一排查。
3. 光路堵塞：若样品室漏液导致光学部件污染，需拆卸清洁并干燥处理。
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