ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌步驟的常見錯(cuò)誤有哪些?
以下是天津本生對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)中洗滌步驟的常見錯(cuò)誤及對(duì)應(yīng)的解決方案,綜合實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵環(huán)節(jié)與優(yōu)化建議:
一、洗滌液配置與使用錯(cuò)誤
緩沖液選擇不當(dāng)?
錯(cuò)誤:直接使用純PBS(不含Tween-20)洗滌,導(dǎo)致非特異性結(jié)合殘留。
解決:需使用含0.05%-0.2% Tween-20的PBST緩沖液,降低表面張力增強(qiáng)洗滌效果。
洗液溫度過低?
錯(cuò)誤:冬季未預(yù)熱洗液,導(dǎo)致洗滌不(“花板”現(xiàn)象)。
解決:洗液溫度應(yīng)維持在20-30℃,避免低溫影響去污效果。
二、手工操作失誤
洗滌不凈
錯(cuò)誤:洗液未注滿孔或靜置時(shí)間不足(<1分鐘),殘留未結(jié)合物質(zhì)。
解決:每孔注滿洗液后靜置1-2分鐘,重復(fù)3-5次,拍板時(shí)垂直扣干。
拍板動(dòng)作不規(guī)范?
錯(cuò)誤:左右甩動(dòng)板子導(dǎo)致孔間交叉污染。
解決:垂直扣板于吸水紙上,避免液體飛濺。
三、洗板機(jī)操作問題
參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤?
錯(cuò)誤:吸液殘留量>2μL或吸頭高度不當(dāng),導(dǎo)致液體殘留。
解決:調(diào)整吸頭距孔底0.5-1mm,每日校準(zhǔn)注液量。
維護(hù)不足?
錯(cuò)誤:未定期清潔吸頭,造成堵塞或污染。
解決:每周用10%次氯酸鈉沖洗管路,更換堵塞吸頭。
四、其他常見錯(cuò)誤
錯(cuò)誤類型? ?后果? ?解決方案?
洗滌次數(shù)不足? 高背景信號(hào)(假陽性) 增加至5-6次,最后一次延長靜置時(shí)間
洗液過期/污染? 絮狀物堵塞孔底 現(xiàn)配現(xiàn)用,過濾混濁洗液
封閉后未充分洗? 非特異性吸附增加 封閉后PBST洗滌3次,去除BSA
五、本生試劑盒特別提示
顯色前處理?:最后一次洗滌后需拍干,避免殘留液體稀釋底物導(dǎo)致顯色異常。
邊緣效應(yīng)?:外圈孔易殘留液體,建議棄用或單獨(dú)處理。
通過規(guī)范操作可減少80%的洗滌相關(guān)誤差。若問題持續(xù),建議聯(lián)系技術(shù)支持獲取定制化方案。
注:以上資料僅供參考,如需更詳細(xì)說明,可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。移液器吸頭
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