計數培養(yǎng)基適用性檢查

1、一般要求

2、胰酪大豆胨瓊脂（TSA）

無菌性檢查：取已滅菌TSA注皿，于30-35℃培養(yǎng)3天，應無菌落生長。

試驗用菌種：金葡、銅綠、枯草、白念、黑曲

接種方法：

涂布法：分別接種不大于100cfu試驗用菌懸液于TSA平板表面；

傾注法：分別接種不大于100cfu試驗用菌懸液于無菌平皿中，傾注約15ml該培養(yǎng)基，輕輕搖勻。

適用性檢查：枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌于30-35℃培養(yǎng)不超過3天；白色念珠菌、黑曲霉于30-35℃培養(yǎng)不超過5天。

判斷標準：與對照培養(yǎng)基比較，菌落平均數比值在0.5-2（50%-200%）范圍內，且菌落形態(tài)大小一致。

3、胰酪大豆胨液體（TSB）

無菌性檢查：取已滅菌的TSB，于30-35℃培養(yǎng)不少于3天，培養(yǎng)基應澄清。

試驗用菌種：金葡、銅綠、枯草

接種方法：

涂布法：分別接種試驗用菌懸液于該培養(yǎng)基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養(yǎng)。

適用性檢查：30-35℃培養(yǎng)不超過3天。

判斷標準：金葡、銅綠、枯草接種后，與對照培養(yǎng)基比較，試驗菌生長良好。

備注：該培養(yǎng)基同時用于稀釋液的制備和控制菌檢查時，需考慮同時滿足計數和控制菌檢查培養(yǎng)基適用性檢查控制要求。

4、沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）

無菌性檢查：取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應無菌落生長。

試驗用菌種：白色念珠菌、黑曲霉

接種方法：

涂布法：分別接種不大于100cfu允試驗用菌懸液于該平板表面

傾注法：接種大于1cfu試驗用菌懸液于無菌平皿中,傾注約15ml該培養(yǎng)基,輕輕搖勻。

適用性檢查：白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天

判斷標準：與對照培養(yǎng)基比較菌落平均數比值在0.5-2(50%一200%)范圍且菌落大小、形態(tài)一致。

備注:如該培養(yǎng)基用于控制菌白色念珠菌的檢查時,同時需要滿足捌菌項下培養(yǎng)基適用性檢查要求。

5、沙氏葡萄糖瓊脂+抗生素

無菌性檢查：取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應無菌落生長。

試驗用菌種：

抑菌性檢查：枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌

促生長能力：白色念珠菌、黑曲霉 。

常用抗生素：

（1）慶大霉素：廣譜。對G-，G+菌有較好的抗菌作用。

（2）氯霉素：廣譜。對G-菌作用強；對G+菌作用不及青霉素與四環(huán)素。

接種方法：

抑菌性：接種枯草、金葡、銅綠菌懸液不少于100cfu。

促生長能力：接種白色念珠菌、黑曲霉菌懸液不大于100cfu。

適用性檢查：

白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天。

與對照培養(yǎng)基比較，菌落平均數比值在0.5-2范圍內。

判斷標準：枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得生長。

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