細(xì)胞STR鑒定FAQ[Frequently Asked Questions(常見問題解答)]
1.什么是細(xì)胞系鑒定?
所謂細(xì)胞系鑒定即通過STR(短串聯(lián)重復(fù))圖譜所建立細(xì)胞系的遺傳特征。一株細(xì)胞系的遺傳特征確立后,細(xì)胞系可以通過定期的檢測,以防止出現(xiàn)細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。
2.為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定?
由于細(xì)胞系發(fā)生交叉污染或身份誤認(rèn),將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的無效或數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。NIH已發(fā)出公告,討論細(xì)胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來越多的的期刊要求文章發(fā)表前、需提供細(xì)胞鑒定數(shù)據(jù)。
3. 細(xì)胞系用錯(cuò)的概率有多大?
據(jù)ATCC估計(jì),1977年錯(cuò)誤使用細(xì)胞的概率是16%,1999年是18%。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),國內(nèi)細(xì)胞系用錯(cuò)的概率不低于20%。即如果一個(gè)研究所有二十個(gè)課題組,按概率估計(jì),有4個(gè)課題組用的細(xì)胞是錯(cuò)的。
4. 什么細(xì)胞最容易污染別的細(xì)胞?
Hela細(xì)胞。因?yàn)樗L得快、長得好嘛。當(dāng)你發(fā)現(xiàn)自己的一個(gè)培養(yǎng)瓶里的細(xì)胞突然長得很好,而以后都用它傳代做實(shí)驗(yàn)的話,十之八九是搞錯(cuò)了。
5. 有哪些細(xì)胞曾被Hela污染?
lnt-407、HEp-2、WISH等一百余種。.
6. 如何進(jìn)行細(xì)胞系鑒定
細(xì)胞系鑒定目前主要基于國際身份認(rèn)證委員會的標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn),可以通過多重?zé)晒?/span>PCR技術(shù),對人源8個(gè)STR位點(diǎn)以及1個(gè)性別決定位點(diǎn)進(jìn)行檢測。下表為這些位點(diǎn)的具體的遺傳信息。
7. 什么時(shí)候需細(xì)胞系鑒定?
(1)當(dāng)建立或獲得一個(gè)新的細(xì)胞系時(shí);
(2)一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開始/結(jié)束時(shí)
(3)在細(xì)胞凍存之前,或細(xì)胞已連續(xù)培養(yǎng)2~3個(gè)月
(4)發(fā)表文章或申請課題經(jīng)費(fèi)前
(5)細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大時(shí)
(6)當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用超過一種細(xì)胞系時(shí),所有細(xì)胞系最好先鑒定以排除交叉污染的可能
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