串聯(lián)泛素結(jié)合實體（TUBEs）的使用正在成為泛素研究中需要的策略（1, 2）。第一代TUBEs能夠與K48和K63連接的四聚泛素鏈結(jié)合，其解離常數(shù)（Kds）在個位數(shù)納摩爾范圍內(nèi)，比單體UBAs的結(jié)合強度高出約100到1000倍。TUBEs還可以在沒有通常用于阻斷此類活性的抑制劑的情況下，保護蛋白質(zhì)免受去泛素化酶（DUBs）和蛋白酶體的降解。這使得在比上述條件更不易改變細胞生理學的情況下，能夠高效地從細胞系、組織和器官中分離天然多泛素鏈及其附著的蛋白質(zhì)。TUBE 1和TUBE 2最近已被證明能夠富集所有多泛素鏈連接類型，且不加區(qū)分，即使目標蛋白的連接類型未知，這些試劑也適用。

K63 TUBE的開發(fā)是為了對K63連接的多泛素鏈（約20納摩爾）顯示出比所有其他連接類型（>2微摩爾）更高的選擇性。它可以單獨使用，也可以與我們的其他TUBE產(chǎn)品（特別是K48 TUBE HF和M1（線性）TUBE）結(jié)合使用，以研究底物蛋白中的多泛素鏈連接類型。磁性TUBEs是直接與磁性珠子偶聯(lián)的TUBE部分，用于通過Western blotting和/或下游蛋白質(zhì)組學研究來鑒定和表征多泛素化蛋白。磁性TUBEs便于實現(xiàn)多泛素化蛋白的便捷“一步”捕獲。

艾美捷K63 TUBE(磁珠)：

貨號：UM-0404M-1000

分子量：不適用

物理狀態(tài)：液體

數(shù)量：1 mL

濃度：可變

儲存：+4℃，避免在此溫度以下儲存

K63 TUBE(磁珠)應(yīng)用：

從細胞和組織提取物中分離和富集K63多泛素化蛋白

分離K63多泛素化蛋白用于蛋白質(zhì)組學研究

K63 TUBE(磁珠)優(yōu)勢：

對K63多泛素鏈的偏好性比其他所有連接類型高出100倍

TUBEs對多泛素的親和力高于大多數(shù)泛素抗體

避免過度表達用于捕獲的表位標簽泛素

K63 TUBE(磁珠)文獻參考：

Hershko, A., and Ciechanover, A. (1998) The ubiquitin-proteasome pathway, Ann Rev Biochem 67, 425- 479.

Messick, T. E., and Greenberg, R. A. (2009) The ubiquitin landscape at DNA double-strand breaks, J Cell Biol 187, 319-326.

Balut, C. M., Loch, C. M., and Devor, D. C. (2011) Role of ubiquitylation and USP8-dependent

deubiquitylation in the endocytosis and lysosomal targeting of plasma membrane KCa3.1, FASEB J 25,3938-3948.

Piper, R. C., and Lehner, P. (2011) Endosomal transportation via ubiquitination, Trends Cell Biol 21, 647- 655.

Olzman, J. A., and Chin, L. S. (2008) Parkin-mediated K63-linked polyubiquitination. A signal for targeting misfolded proteins to the aggresome-autophagy pathway, Autophagy 4, 85-87.

Tan, Y. K., Vu, H. A., Kusuma, C. M., and Wu, A. (2009) Implications of autophagy in anthrax

pathogenicity, Autophagy 5, 734-735.

Lim, K. L., and Lim, G. G. (2011) k63-linked ubiquitination and neurodegeneration, Neurobiol Dis 43, 9-16.

Hjerpe, R., Aillet, F., Lopitz-Otsoa, F., Lang, V., England, P., and Rodriguez, M. S. (2009) Efficient protection and isolation of ubiquitylated proteins using tandem ubiquitin-binding entities, EMBO Rep 10, 1250-1258.

Hjerpe, R., and Rodriguez, M. S. (2008) Efficient approaches for characterizing ubiquitinated proteins,Biochem Soc Trans 36, 823-827.