植物提取試劑盒使用方法

　　以下是常見植物提取試劑盒的使用方法及注意事項，涵蓋DNA、RNA及蛋白類樣本的提取流程：

　　一、DNA提取(離心柱法)

　　樣本預(yù)處理?

　　液氮研磨新鮮組織(100-200mg)或干燥組織(50-100mg)至細(xì)粉狀

　　多糖多酚樣本需額外加入沉淀溶液去除雜質(zhì)

　　裂解與純化?

　　加入裂解緩沖液(如Buffer HB)和Proteinase K，50℃裂解30分鐘

　　離心后取上清，加入沉淀緩沖液(Buffer PB)冰浴10分鐘

　　柱純化?

　　轉(zhuǎn)移至吸附柱，依次用去蛋白液和漂洗液洗滌

　　低鹽緩沖液(Buffer EB)洗脫DNA

　　二、RNA提取(硅膠柱法)

　　裂解階段?

　　液氮研磨后加入含巰基乙醇的提取液，65℃水浴裂解

　　酸酚(pH4.5)抽提去除蛋白

　　沉淀與純化?

　　加入LiCl溶液4℃沉淀過夜

　　硅膠柱吸附RNA，乙醇洗滌后DEPC水洗脫

　　三、植物ELISA試劑盒操作

　　樣本制備?

　　勻漿后離心取上清，避免多糖干擾

　　檢測流程?

　　標(biāo)準(zhǔn)品與樣本同步孵育，洗滌后加入酶標(biāo)二抗

　　顯色后酶標(biāo)儀讀取OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量

　　四、通用注意事項

　　防污染?：RNA操作需全程使用RNase-free耗材

　　溫度控制?：裂解和孵育需嚴(yán)格控溫(如65℃水浴)

　　試劑添加?：漂洗液等需按比例加入無水乙醇

　　規(guī)格推薦：

　　植物提取試劑盒             填料

　　DNA提取試劑盒(MAXI)        50rxn600μl

　　DNA提取試劑盒(STD)         100rxn300μl

　　DNA提取試劑盒(MINI)        100rxn100μl

　　DNA快檢提取試劑盒           500rxn50μl

　　注：不同品牌試劑盒步驟可能存在差異，需以說明書為準(zhǔn)。以上資料僅供參考，具體請咨詢技術(shù)老師或供應(yīng)商。

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