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糞大腸菌群的分類標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)方法及檢驗(yàn)注意事項(xiàng)!

來源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年05月16日 16:31  

一、菌種簡(jiǎn)介

糞大腸菌,生長(zhǎng)于人和溫血?jiǎng)游锬c道中的一組腸道細(xì)菌。糞大腸菌群是生長(zhǎng)于人和溫血?jiǎng)游锬c道中的一組腸道細(xì)菌,隨糞便排出體外,約占糞便干重的1/3以上,故稱為糞大腸菌群。

 

二、術(shù)語釋義

糞大腸菌群是大腸菌群的一種,受糞便污染的水、食品、化妝品和土壤等物質(zhì)均含有大量的這類菌群。若檢出糞大腸菌群即表明已被糞便污染。

 

二、分類

1、大腸菌群是指一群好氧及兼性厭氧,在37℃、24h能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,它主要來源于人畜糞便,通??勺鳛樗w糞便污染的指標(biāo)菌大腸菌群。

2、大腸菌群是指37℃生長(zhǎng)時(shí)能發(fā)酵乳糖,在24h內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭陰性無芽孢桿菌,除包括大腸埃希氏桿菌屬外,還包括腸桿菌科的腸桿菌屬、枸椽酸菌屬、克雷伯菌屬。

3、大腸菌群是指一群能在36℃,24h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽胞桿菌.它主要包括腸桿菌科的大腸埃希氏菌、枸椽酸桿菌、克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌。

 

三、文獻(xiàn)來源

大腸菌群并非細(xì)菌學(xué)分類命名,而是衛(wèi)生細(xì)菌領(lǐng)域的用語,它不代表某一個(gè)或某一屬細(xì)菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌,這些細(xì)菌在生化及血清學(xué)方面并非一致,其定義為:需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。

大腸菌群分布較廣,在溫血?jiǎng)游锛S便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明,大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)常活動(dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方,人、畜糞便對(duì)外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主,而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。

大腸菌群是作為糞便污染指標(biāo)菌提出來的,主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中有否糞便污染。大腸菌群數(shù)的高低,表明了糞便污染的程度,也反映了對(duì)人體健康危害性的大小。糞便是人類腸道排泄物,其中有健康人糞便,也有腸道患者或帶菌者的糞便,所以糞便內(nèi)除一般正常細(xì)菌外,同時(shí)也會(huì)有一些腸道致病菌存在(如沙門氏菌、志賀氏菌等),因而食品中有糞便污染,則可以推測(cè)該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性,潛伏著食物中毒和流行病的威脅,必須看作對(duì)人體健康具有潛在的危險(xiǎn)性。

糞大腸菌群和飲用水,國(guó)家飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,飲用水中大腸菌群不得檢出。

 

四、檢測(cè)方法

1、糞大腸菌群檢測(cè)方法

糞大腸菌為總大腸菌群的一個(gè)亞種;直接來自糞便,除了它耐熱,在44-44.5℃的高溫條件下仍可生長(zhǎng)繁殖并將色氨酸代謝成吲哚,其他特性均與總大腸菌群相同。

總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的最合適溫度為25℃左右,如在37℃培養(yǎng)則仍可生長(zhǎng),但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,則不再生長(zhǎng),而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌,習(xí)慣于37℃左右生長(zhǎng),如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長(zhǎng)。因此,可用提高培養(yǎng)溫度方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分。在37℃培養(yǎng)生長(zhǎng)的大腸菌群,包括在糞便內(nèi)生長(zhǎng)的大腸菌群稱為“總大腸菌群”(Total coliform);在44.5℃仍能生長(zhǎng)的大腸菌群,稱為“糞大腸菌群”(Fecal coliform),糞大腸菌群細(xì)菌在衛(wèi)生學(xué)上具有重要的意義。

2、檢驗(yàn)注意事項(xiàng)

(1)將接種好的樣品放人恒溫水浴箱或隔水式恒溫培養(yǎng)箱時(shí),箱內(nèi)溫度一定要求達(dá)到所要求的溫度(44±1℃)時(shí),方可放入。如用恒溫水浴箱其水面要高于接種物面,放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。

(2)MFC培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果用進(jìn)口苯胺藍(lán)加O.1g,用國(guó)產(chǎn)苯胺藍(lán)加0.2g,培養(yǎng)出的糞大腸菌菌落顏色較典型。但國(guó)產(chǎn)苯胺藍(lán)的性能是否同樣穩(wěn)定尚不能肯定。因此,制好的培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對(duì)比菌落的顏色。

玫紅酸高壓后會(huì)分解,配好的試液應(yīng)在2-lO℃保存不超過2周,如顏色由暗紅變成棕色沉淀時(shí)應(yīng)棄去。如雜菌污染少,且加與不加玫紅酸對(duì)菌落計(jì)數(shù)無影響時(shí),可不加。

(3)在濾膜上生長(zhǎng)的菌落除挑取藍(lán)色菌落外,淺藍(lán)色菌落或淺藍(lán)色中心較深的菌落也應(yīng)挑取。

(4)生活飲用水通常都是經(jīng)氯處理消毒的,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),在采集水樣時(shí)應(yīng)加硫代硫酸鈉脫氯,使此受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù),從而避免計(jì)數(shù)結(jié)果偏低甚至假陰性出現(xiàn)。

(5)采樣后水樣的正確保存很重要,如保存不當(dāng)可使檢樣中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長(zhǎng),這些都將影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢驗(yàn)室接到水樣后,應(yīng)立即檢驗(yàn)。如因故不能檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)立即置于冰箱內(nèi)并于2小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)。

關(guān)于水樣儲(chǔ)存時(shí)間與溫度對(duì)大腸菌群數(shù)的影響,Lonsans等報(bào)告認(rèn)為水樣中大腸菌群數(shù)不多時(shí),則冰箱保存與室溫保存相差不大;如水樣中菌數(shù)多時(shí),則在室溫(23-39.5℃)內(nèi)保存比在冰箱(0-1O℃)中保存菌數(shù)的減少速度快。

 

五、檢測(cè)儀器

水質(zhì)糞大腸菌群檢測(cè)儀器

JMS2009型大腸菌群在線快速監(jiān)測(cè)儀,可以對(duì)大腸桿菌,總大腸菌群,糞大腸菌群,總糞大腸桿菌等多種生活中常見菌類進(jìn)行快速檢測(cè)。

1、儀器特點(diǎn)

自動(dòng)檢測(cè)

操作簡(jiǎn)便,不需要復(fù)雜、昂貴的實(shí)驗(yàn)室器材和專業(yè)人員即可現(xiàn)測(cè)試

自動(dòng)取樣頻率可編程設(shè)定:從每小時(shí)一次~每24小時(shí)一次

檢測(cè)周期短,小于12小時(shí)(分析速度快)

可高通量連續(xù)檢測(cè)

真正做到實(shí)時(shí)、在線、自動(dòng)檢測(cè)

多種輸出功能

糞大腸菌群檢測(cè)儀

2、測(cè)量原理

FC培養(yǎng)液是宜大腸菌群和糞大菌群生長(zhǎng)的

微生物培養(yǎng)基,大腸菌群和糞大腸菌群含有一種特異

性酶,本系統(tǒng)采用的底物可被這種特異性酶分解釋放

出一種化合物,使培養(yǎng)基的顏色發(fā)生變化。本系統(tǒng)通

過檢測(cè)培養(yǎng)基的顏色變化,檢測(cè)水體中的大腸菌群及

糞大腸菌群。FC培養(yǎng)液是產(chǎn)品。

3、應(yīng)用范圍

適用于飲用水、地表水、地下水及污水等大腸菌群、

糞大腸菌群的自動(dòng)監(jiān)測(cè)。

4、樣品分析方法

將水樣注入FC培養(yǎng)液,在一定溫度下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)

(大腸菌群需恒溫36.5°C,糞大腸菌需恒溫44.5°C)。通

過連續(xù)光度測(cè)量,檢測(cè)水樣中的大腸菌群和糞大腸菌群。

每個(gè)樣品測(cè)量結(jié)束后,儀器自動(dòng)對(duì)管路進(jìn)行滅菌處理。

5、技術(shù)參數(shù)

采樣體積:1.5L

檢出限:1個(gè)/100ml

采樣頻率:1小時(shí)(可調(diào))

測(cè)量周期:最長(zhǎng)12小時(shí)

檢測(cè)時(shí)間:少于12小時(shí)

培養(yǎng)溫度:36.5°C或44.5°C

管路消毒:每次測(cè)量前,污染后

管路清洗:每次管路消毒后

試劑:培養(yǎng)液:1瓶/樣品

次氯酸鈉(有效氯:0.5%):5L星期

零點(diǎn)校正:每次進(jìn)樣前自動(dòng)校正

參比溶液:培養(yǎng)液

通訊接口:RS232或485

報(bào)警信號(hào):控制器故障、溫度故障、微處理

故障、儀器故障

遠(yuǎn)程控制:遠(yuǎn)程控制啟動(dòng)和待機(jī)

環(huán)境:防潮、防塵、溫度0~40°C

電源:220VAC/50HZ

防護(hù)等級(jí):IP55

外型尺寸:

重量:100kg

 

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