微重力3D旋轉細胞培養(yǎng)系統(tǒng)通過模擬微重力或超重力環(huán)境，為細胞和組織研究提供了更接近體內(nèi)生理狀態(tài)的實驗條件。該系統(tǒng)在再生醫(yī)學、腫瘤研究、藥物篩選等領域應用廣泛。本文從設備組成、操作流程、注意事項等方面，為新手提供一份詳細的操作指南。

一、系統(tǒng)組成與安裝  

1. 核心組件  

  - 控制器：用于設置旋轉模式、速度、重力參數(shù)等，通常配備觸屏操作界面。  

  - 回旋主機：放置在培養(yǎng)箱內(nèi)的核心部件，通過多軸旋轉模擬微重力或超重力環(huán)境。例如，北京基爾比生物公司研制的 Kilby Gravite系統(tǒng)通過兩軸旋轉實現(xiàn)10?3g的微重力模擬，而超重力模式可達到2-5g。  

  - 培養(yǎng)容器（可以定制搭載架）：支持T25透氣型培養(yǎng)瓶（標配12個）、灌流器官芯片、定制化支架或轉壁式EP管生物反應器，適用于懸浮或貼壁細胞培養(yǎng)。  

2. 安裝步驟

  - 培養(yǎng)箱內(nèi)擺放：確保旋轉座與培養(yǎng)箱內(nèi)壁至少保留10cm間隙，避免運動部件碰撞。  

  - 連接電纜：使用配套扁平電纜連接控制器與主機，注意接口防塵。  

  - 電源要求：輸入電壓需為220V交流電，避免因電壓不穩(wěn)導致設備故障。  

二、基本操作流程  

1. 參數(shù)設置*

  - 重力模式選擇：  

    - 微重力：選擇兩軸旋轉模式（如1-4rpm），可模擬國際空間站級的10?3g環(huán)境。  

    - 超重力：單軸旋轉模式（如2-5g），適用于研究細胞在高壓環(huán)境下的響應。  

  - 程序預約：通過觸屏設置定時啟動、旋轉速度梯度變化等復雜程序。  

2. 培養(yǎng)容器準備

  - 懸浮細胞培養(yǎng)：使用T25培養(yǎng)瓶或轉壁式EP管反應器，確保培養(yǎng)基充注量，避免旋轉時溢出。  

  - 3D球體培養(yǎng)：優(yōu)化細胞密度（如5×103~1×10? cells/mL），添加低血清培養(yǎng)基以減少貼壁生長干擾。  

3. 系統(tǒng)啟動與監(jiān)測

  - 實時重力監(jiān)測：通過重力傳感器查看X/Y/Z軸重力數(shù)值（精度±0.001G），確保實驗條件穩(wěn)定。  

  - 環(huán)境兼容性：系統(tǒng)支持37°C、5% CO?培養(yǎng)箱環(huán)境，需提前校準溫濕度參數(shù)。  

三、關鍵注意事項  

1. 安全操作

  - 避免電磁干擾：控制器需遠離強磁場環(huán)境，防止觸屏失靈或數(shù)據(jù)異常。  

  - 運動部件檢查：啟動前確認旋轉框無阻擋，防止機械故障。  

2. 實驗優(yōu)化建議

  - 細胞類型適配：貼壁細胞需預涂基質(zhì)膠（如Matrigel），而懸浮細胞可直接使用轉瓶培養(yǎng)。  

  - 動態(tài)環(huán)境模擬：可以結合微流控芯片或低氧培養(yǎng)箱，可進一步模擬腫瘤微環(huán)境中的氧梯度或藥物滲透差異。  

3. 維護與校準

  - 定期清潔：用75%酒精擦拭旋轉座表面，防止污染。  

  - 傳感器校準：定期進行一次重力傳感器校準，確保數(shù)據(jù)準確性。  

四、常見問題與解決方案  

1. 細胞聚集不均：可能因轉速過高或細胞密度不當，可調(diào)整至低速模式（如1-2rpm）并優(yōu)化接種密度。  

2. 重力數(shù)據(jù)異常：檢查傳感器連接是否松動，必要時重啟系統(tǒng)并重新校準。  

3. 培養(yǎng)瓶漏液：確認瓶蓋密封性，避免使用破損容器；超重力模式下建議減少培養(yǎng)基體積。  

五、新手進階建議  

1. 培訓資源：多數(shù)品牌提供免費操作培訓（如（Rotary Cell Culture System，RCCS）生產(chǎn)制造商北京基爾比生物科技有限公司），建議參與以掌握高級功能。  

2. 文獻參考：查閱系統(tǒng)配套案例（如胚胎干細胞微重力分化研究），學習參數(shù)設置經(jīng)驗。  

3. 小試實驗：第一次使用建議從小規(guī)模培養(yǎng)開始，逐步優(yōu)化轉速、重力模式等參數(shù)。  

通過以上操作指南，新手可快速掌握微重力3D旋轉細胞培養(yǎng)系統(tǒng)的核心功能與實驗技巧。更多技術細節(jié)可參考廠商提供的說明書或聯(lián)系技術支持（如（Rotary Cell Culture System，RCCS）生產(chǎn)制造商北京基爾比生物科技有限公司）。

附：

北京基爾比生物公司——微重力旋轉細胞培養(yǎng)系統(tǒng)（rotary cell culture system，RCCS）

Kilby 3D-clinostat 三維旋轉儀，

Kilby Gravite 微/超重力細胞旋轉培養(yǎng)系統(tǒng)，

3D回轉重力環(huán)境模擬系統(tǒng)，隨機定位儀，

類器官芯片搖擺灌注儀，

Kirkstall 類器官串聯(lián)芯片灌流仿生構建系統(tǒng)