3-Nitrotyrosine-Peroxidase Conjugate, 3-硝基酪氨酸-過氧化物酶標記物
3-硝基酪氨酸-過氧化物酶標記物是一種通過化學交聯方法將3-硝基酪氨酸與辣根過氧化物酶(HRP)連接而成的偶聯物。以下是其詳細介紹:
成分與結構
3-硝基酪氨酸(3-Nitrotyrosine,3-NT):是一種由過氧化亞硝酸鹽從L-酪氨酸合成的化合物,是一氧化氮和超氧化物的產物,可作為組織中過氧亞硝基陰離子(Peroxynitrite,ONOO-)水平的定量檢測標準,也是蛋白質硝化(Protein Nitration)的產物。
辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP):是一種由微生物或植物產生的氧化還原酶,以過氧化氫為電子受體催化底物氧化,主要存在于細胞的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。
制備方法
通常采用化學交聯技術,如碳二亞胺法等,將3-硝基酪氨酸與辣根過氧化物酶連接起來,形成穩定的偶聯物。具體的制備過程可能包括反應條件的優化、純化步驟的設定等,以確保偶聯物的質量和活性。
性質特點
溶解性:一般溶于磷酸鹽緩沖液(PBS)等生理溶液中,形成穩定的溶液。
穩定性:在適當的保存條件下(如-20℃以下避光保存),該偶聯物能夠保持較長的保質期和穩定性。
生物活性:保留了3-硝基酪氨酸的生物活性,并通過辣根過氧化物酶的催化功能實現信號放大和檢測。
應用領域
生物醫學研究:可用于研究3-硝基酪氨酸的代謝途徑、生理功能以及與其他生物分子的相互作用等,為相關疾病的發病機制研究提供重要依據。
免疫檢測:該偶聯物可用于酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等免疫檢測技術中,作為檢測抗體或抗原的標記物,具有高靈敏度和特異性。
疾病診斷與治療:由于3-硝基酪氨酸在多種疾病中的水平變化,其與辣根過氧化物酶的偶聯物有望在疾病的診斷和治療中發揮重要作用。
保存與運輸
保存條件:為確保偶聯物的穩定性和活性,應將其儲存在-20℃以下的避光環境中,并避免反復凍融或長時間暴露在室溫下。
運輸條件:在運輸過程中,應保持低溫環境,并避免劇烈震動和陽光直射。
注意事項
在使用過程中,應注意監測其活性和穩定性,以確保實驗結果的準確性和可靠性。
應嚴格遵守相關的操作規程和安全防護措施,避免與皮膚、眼睛等直接接觸。如不慎接觸,應立即用大量清水沖洗并就醫。
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