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植物提取物中的蒽醌類及其苷大多數(shù)是黃色或橙紅色的，羥基蒽醌能溶于堿溶液中而顯紅或紫紅色；蒽酚和二葸醌與堿液不顯紅色，只能呈黃色，需經(jīng)氧化成羥基蒽醌后才與堿作用顯紅色；羥基蒽醌類因結(jié)構(gòu)不同與乙酸鎂的甲醇溶液反應(yīng)可顯橙、紅、藍(lán)、紫等色，根據(jù)此性質(zhì)可進(jìn)行比色測定。
1．標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
取經(jīng)五氧化二磷干燥24h的大黃素（或大黃酸、1，8-=羥基蒽醌）對照品適量，用堿液（Imol/L氫氧化鈉溶液或其與2%氫氧化銨溶液的混合溶液）或0.5%一1%乙酸鎂甲醇溶液定容，在500～550nm波長處掃描，在最大吸收波長處測定吸光度，以吸光度對濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性范圍4～24ug/ml。
2．游離蒽醌的測定
取藥物細(xì)粉或其制劑粉末適量(約相當(dāng)于游離蒽醌1. 5mg)加（或氯仿）溶解，或用索氏提取器回流提取至提取液無色。將揮干，殘渣用甲醇溶解，加乙酸鎂甲醇溶液至定容；或?qū)⑻崛∫阂迫敕忠郝┒分?，用堿液提取并定容，比色測定，依標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。
3．總蒽醌的測定
(1)先水解后提取 取供試品適量(約相當(dāng)于總蒽醌1.5mg)，用酸液（1—7. 5mol/L硫酸溶液或1.5～6mol/L鹽酸溶液）20～30ml，水浴回流1～2h，以使結(jié)合態(tài)的蒽醌苷水解，使葸醌游離，再用（或氯仿）萃取，并將過濾的藥物殘渣及濾紙經(jīng)50℃干燥后用回流提取，待索氏提取器內(nèi)提取液無色，合并液，照游離蒽醌測定法測定。
對含還原型蒽酮苷（如番瀉苷）的樣品，根據(jù)其可被氯化鐵氧化，酸水解成氧化型蒽醌苷元這一原理，稱取供試品適量，加水30ml超聲處理1 5-30min（提高溶解、提取效率，大大縮短溶解、提取時間），加10. 5%氯化鐵溶液20ml，回流20～60min，加鹽酸1～3ml繼續(xù)回流30min，放冷，再進(jìn)行萃取與測定。
蒽醌類與堿液顯色后，過氧化氫不能使其褪色，而其他有色物質(zhì)可被其氧化褪色，對含有干擾測定成分的堿萃取液，加1%過氧化氫溶液少量，在沸水浴中加熱4min氧化，冷卻，定容，比色測定。
(2)先提取后水解 取供試品適量，加甲醇（或乙醇、氯仿等），對含葸醌的浸膏制劑，超聲處理30min，使溶解。對含蒽醌的原植物藥粉末制劑，應(yīng)置索氏提取器中回流提取，至提取液無色，將甲醇回收至干，殘渣用酸液水解，（或氯仿）萃取，依法測定。
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