H9C2转染、大鼠心肌细胞--上海转染生物ZetaLife

贴壁细胞质粒转染步骤：

1、质粒提取：使用无内毒素提取试剂盒

2、质粒溶解：溶于超纯水或双蒸水，一定不能溶于试剂盒Buffer等其他试剂

3、质粒荧光：若质粒不带荧光、请使用荧光对照，方便查看转染效率

4、质粒浓度：500-600ng/ul

5、质粒和转染试剂复合物制备：取质粒8ug和转染试剂8ul混合，吹打混匀室温静置15分钟，无需另外加入任何试剂稀释

6、细胞转染前状态：拍照片留存

7、贴壁细胞铺板：6孔板*培养基2ml、培养基中不加双抗，细胞密度：60%左右

8、转染：将复合物加入轻摇混匀、培养箱培养

9、换液：转染24小时后培养基换液

10、转染效率：转染48小时后拍荧光照片，查看转染效率

11、转染后细胞状态：拍明场细胞状态照片

12、检测：总计转染48小时后提取RNA或蛋白检测

?ZetaLife Advanced DNA/RNA Transfection Reagent优秀特点：

1、转染效率高：新型高分子材料载量大、体积大小是脂质体的1/10、进入细胞能力强

2、无细胞毒性：进入细胞后可以被代谢成水和二氧化碳的转染试剂

3、不激活细胞表面或细胞体内marker，不激活细胞免疫机制

4、对细胞膜无物理性损伤，不易出现细胞变形、利于细胞保持较高活力

5、可反映真实的细胞通路蛋白原始数据

6、操作简单：含血清*培养基转染、无需4-6h换无需购买无血清培养

7、可高效率转染siRNA到任何干细胞、免疫细胞、原代细胞、悬浮细胞及细胞系

上海转染生物科技有限公司是服务于高校和科研院所生命科学研究、生物医药研发、生物制品生产、基因和细胞治疗等领域高科技生物技术企业。提供的第三代高分子、细胞内可代谢的转染试剂，解决了难转染细胞转染效率低、脂质体转染毒性大致细胞死亡多、需要无血清环境的这些问题，比如：RAW264.7、THP-1、精原干细胞、IPS细胞、BMDM、MT-4人淋巴T细胞、SW480、A549、U87细胞等；提供的活体动物可代谢体内转染试剂，可转染长片段质粒DNA至体内 可通过静脉注射或体内局部组织注射的简单方式完成转染过程; 提供的无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物制品生产公司提供无血清的细胞规模生产支持；提供以植物生物为平台基因序列人源化、细胞培养可分解的3D基质胶产品；提供内毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品等。

美国Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的第三代高分子转染试剂，此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。