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高速逆流色譜儀的技術(shù)特點(diǎn)及應(yīng)用介紹
高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography，簡(jiǎn)稱HSCCC)，是一種連續(xù)高效的液液分配色譜技術(shù)，與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。同時(shí)它也具有適用范圍廣、快速、進(jìn)樣量大、費(fèi)用低、回收率高等優(yōu)點(diǎn)。因此，己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用，尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域受重視。
高速逆流色譜是一種液-液色譜分離技術(shù)，它的固定相和流動(dòng)相都是液體，沒(méi)有不可逆吸附，具有樣品無(wú)損失、無(wú)污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn)。由于HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有明顯的優(yōu)點(diǎn)，因此此項(xiàng)技術(shù)己被廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、保健食品、生物化學(xué)、生物工程、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機(jī)合成、環(huán)境分析等領(lǐng)域。它相對(duì)于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術(shù)，具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。HSCCC 技術(shù)正在發(fā)展成為一種備受關(guān)注的新型分離純化技術(shù)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域， 特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認(rèn)為是一種有效的新型分離技 術(shù)；適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。
高速逆流色譜法的技術(shù)特點(diǎn)
1．應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好
由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無(wú)限多的，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來(lái)的吸附損失，適用于分離極性物質(zhì)。
2．操作簡(jiǎn)便，容易掌握
儀器操作簡(jiǎn)單，對(duì)樣品的預(yù)處理要求低，一般的粗提物即可進(jìn)行的制備分離或分析。
3．回收率高
不需要固相載體，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，理論上樣品的回收率可達(dá)。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件，一般都有很高的回收率。
4．重現(xiàn)性好
如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用，酸堿性也不強(qiáng)，即使多次進(jìn)樣，其分離過(guò)程都保持很穩(wěn)定，而且重現(xiàn)性相當(dāng)好。
5．分離效率高，分離量較大
由于其與一般的色譜分離方式不同，能實(shí)現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫，亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣，使其特別適用于制備性分離，產(chǎn)品純度高，制備量大。
6．分配系數(shù)
溶劑系統(tǒng)的選擇是同時(shí)選擇色譜分離過(guò)程的兩相，是對(duì)樣品成功分離的關(guān)鍵所在，而樣品中各組分的分配系數(shù)決定著這種溶劑系統(tǒng)是否合適，因此分配系數(shù)的測(cè)定是選擇溶劑系統(tǒng)的重要環(huán)節(jié)。分配系數(shù)的測(cè)定多采用薄層色譜法、毛細(xì)管電泳法、HPLC法、生物活性分配比率法及分析型HSCCC法。
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