熔蠟儀在組織脫水浸蠟實驗中的使用方法
組織經過透明劑的*透明后,被移放于使用熔蠟儀熔化后的65℃左右的石蠟中,于65℃的電熱恒溫箱中浸漬的過程稱為浸蠟。組織在脫水時,組織中的脂類和類脂等物質在脫水劑的作用下被溶解掉,留下了許多腔隙,許多管腔組織和血管,也有許多腔隙,這些都嚴重地影響了切片。組織浸蠟時,由于誘導劑(二甲苯)的作用,石蠟進入到組織的各個角落,并在各個角落中保存下來。當石蠟包埋后冷卻時,這浸入到里面的石蠟便可起到支撐的作用,而且使組織不致于變形,塌陷等現(xiàn)象,使切片能完整的切出,便于鏡下觀察。
由于生物樣品各種組織成分不同,因此性質也各異,如軟硬程度,疏松、致密程度,面積大小等都不相同,自然狀態(tài)下要將它們切成十幾微米甚至幾個微米的薄片,幾乎是辦不到的。包埋(embedding)就是將某些特殊的支持物質浸入到組織塊內部,利用支持物質的物理特性,如由液態(tài)轉變成固態(tài),使整個組織具有均勻一致的固態(tài)結構和足夠的硬度,以利于用切片機制取極薄的切片。利用石蠟(paraffin)作為包埋劑,將浸過蠟的組織塊置于石蠟內制成蠟塊,是組織學切片技術中zui常用的一種包埋方法。
使用常規(guī)技術制作切片或超薄切片時,由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質浸透組織內部,整個組織一樣硬化,先將熔化的石蠟注入包埋托內(模具),而后用鑷子將經過浸蠟的組織塊從脫水盒中取出,放入包埋托中央,放在小冷臺上,用鑷子輕按組織塊,以達到組織塊平整,蓋上脫水盒底,再加好石蠟,移至冷凍臺上,待冷凍好后,卸下組織蠟塊待切。
熔化石蠟時使用熔蠟儀操作更加方便,在熔蠟儀桶內放置蠟塊前應先關閉電源,固態(tài)蠟塊要切成小塊后放入,建議切成<50×50×50mm塊狀,過大的蠟塊會損壞桶內的保護網罩。根據放入石蠟的軟硬,設定恰當的溫度,石蠟有軟蠟和硬蠟之分,軟蠟的熔點有45℃、52~54℃。硬蠟的熔有56~58℃,58~60℃、60~62℃。使用過程中應隨時觀察,當桶內的蠟液低過桶體的1/3時,要及時加蠟。加熱使用時溫度波動會比較大,這屬正?,F(xiàn)象,當一段時間溫度恒定后即可正常使用。英格爾熔蠟儀在運行過程中應不定時的進行攪拌,可以提高精度均勻性。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。