基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以无活性的酶原形式分泌,活化后能够降解 细胞外基质的胶原蛋白,又称胶原酶。通过影响细胞外基质,胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组 织重塑等过程,并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。血浆与组织中的 MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程,其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视 。
本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测 MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一种广为使用的、基 于 SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达 1 nM,高于 ELISA 方法 2,其 基 本原理和程序是:制备加有胶原酶底物的 SDS-PAGE 凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电 泳, 电泳结束后取出凝胶与酶反应 Buffer 孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深 染,形 成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色 而形成透 亮区域,从而能同时指示 MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶谱)及活性。明胶酶谱法试剂盒,本试剂盒提供MMP-2、MMP-9 特异蛋白底物及酶学反应缓冲液,可检测少至 0.1~0.5 µl 血液中的 MMP-2、MMP- 9 酶谱及活性,检 测灵敏度~1 nM。试剂盒可进行 50 次标准小胶检测,如果小胶加样孔为 10~15个,则总计可检测 500~750 个样品。
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