仪器室要保持整洁、干净、无尘;配套设施布局合理。 ?
仪器室温度应相对稳定,一般应控制在20-25℃,保持恒温;相对湿度为50-70%,室内应备有温度计和湿度计。 ?
仪器室电源要求相对稳定,电压变化要小,配备不间断稳压电源,防止意外停电。 ?
溶剂和流动相的要求: 所有的流动相都要使用0.22um的滤膜过滤,水相要新配,并不得超过二天。样品必需使用0.22um的膜过滤。 ?
机械泵的振气: 于ESI源,至少每星期做一次,对于APCI源,每天做一次。振气时需停止样品采集、停止流动相、关闭高压、关闭所有气流,关闭离子源内的真空隔离阀。 ?
开高压之前一定要先开氮气;关氮气之前一定要先关高压。在没开氮气和高压之前不要开流动相或流动相是waste状态。 ?
ESI离子化与溶剂密切相关,在使用某些溶剂和添加物需要注意以下几个方面:TFA多用于蛋白质和多肽分析,但对ESI离子化有抑制效应;三乙胺(TEA)在m/z 102处有较强[M+H]+峰,有可能会抑制某些碱性化合物在正离子ESI条件下的离子化,也有可能会增强某些碱性化合物在负离子ESI条件下的响应。 ?
要避免使用非挥发性的盐 (phosphate, borate, citrate,etc.);表面活性剂、清洁剂和去污剂 (会抑制离子化);以及无机酸 (sulphuric acid, phosphoric acid etc.)等。 ?
连接UPLC泵、色谱柱、注射泵以及ESI探头时,要将仪器置standby状态。 ?
当改变分辨率的时候,仪器的质量数也会有轻微的偏移,所以在不同分辨率的条件下,应该做质量数校正。 ?
样品贮存在塑料离心管中,其中的添加剂很容易混入,尤其是被有机溶剂浸泡时间较长时,会产生干扰物信号。 ?
工作站计算机不要安装与仪器操作无关的软件,要经常清理计算机磁盘碎片,定期查杀病毒,定期备份实验数据。
仪器应定期检查,并有专人管理,负责维护保养。 ?
实验完毕要清洗进样针、进样阀等,用过含酸的流动相后,色谱柱、离子源都要用甲醇/水冲洗,延长仪器寿命。 ?
定期清洗样品锥孔:关闭隔离阀,取下样品锥孔,先用甲醇:水:甲酸(45:45:10)的溶液超声清洗10分钟,然后在分别用超纯水和甲醇各溶液超声清洗10分钟,待晾干后再安装到仪器上。当灵敏度下降时,需要清洗Source、二级锥孔和六级杆。 ?
定期(每星期)检查机械泵的油的状态,如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3000小时,要及时更换机械泵油。
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