磁珠分选细胞实验步骤

磁珠分选是一种常用的细胞分离技术，特别适用于免疫细胞的纯化。

以下是基于最新信息的磁珠分选细胞实验步骤：

1.样本准备：

  1.1使用抗凝剂处理外周血液样本，并通过密度梯度离心法分离出PBMC（外周血单个核细胞）。

  1.2如果处理组织样本，需要将组织切碎并消化以制备单细胞悬浮液。

2.磁珠标记：

  2.1计算细胞数量，并根据需要添加适量的磁珠。例如，对于每1亿细胞，可能需要添加一定体积的磁珠。

  2.2将磁珠与细胞悬液混合，轻轻混匀后在冰上孵育，以促进磁珠与目标细胞表面标志物的结合。

3.磁性分?。?/p>

  3.1将磁珠标记的细胞悬液通过带有磁性的分选柱。磁珠与细胞结合后会被吸附在分选柱中，而未标记的细胞则随缓冲液流出。

  3.2洗涤分选柱以去除未结合的磁珠和杂质。

  3.3使用适当的缓冲液将吸附在分选柱上的目标细胞洗脱，收集洗脱液中的细胞。

4.细胞收集与鉴定：

  4.1收集洗脱的细胞，并进行必要的洗涤步骤以去除残留的磁珠。

  4.2使用流式细胞术或其他细胞鉴定方法检查细胞的纯度和活性。

5.实验注意事项：

  5.1在整个实验过程中，应保持细胞的低温处理，以维持细胞活性。

  5.2操作时应轻柔，避免对细胞造成机械性损伤。

  5.3确保使用的磁珠和抗体特异性高，以提高分选效率和纯度。