德国RETSCH公司RM100/KM100碾磨仪在酵母细胞冷冻研磨萃取中的应用

随着基因研究及相关分析技术的迅速发展,为萃取完整的RNA链和RNA序列,寻求一种快速有效的破碎酵母细胞的方法,变得越来越重要。

德国RETSCH公司推出的KM 100 /RM100研钵体研磨仪提供了一种有效的冷冻破碎酵母细胞的方法:


KM100研磨仪
- 样品zui大进样尺寸：10毫米
- zui终出样尺寸：大约0.03毫米

RM100研磨仪
- zui大进样尺寸：8毫米
- zui终出样尺寸：大约0.01毫米


细胞淬取前的样品研磨:


萃取质量和效率的提高直接影响到样品中蛋白质浓缩的程度. 事实证明，在RM100/KM100研磨仪中加适量液氮的研磨方法得到的细胞样品较其他破碎细胞方法得到的细胞样品具有更好的萃取效果。
而萃取的结果又是染色质聚合和RNA聚合酶 Ⅰ、Ⅲ尤其是RNA聚合酶Ⅱ的复制基础，德国RETSCH公司生产的RM 100、KM 100型槌磨仪就可以胜任这种复杂的应用，因为他们结合了以下优势：


★ 磨槌的压力是可以调整并固定的，因此对不同的样品可选择研磨力度,并且研磨的结果具有高重复性；
★ 封闭的容器和研磨膛，操作洁净并安全；
★ 宽范围的样品处理量：RM100为10到150毫升，KM100为300毫升；
★ 可在研磨过程中连续加入液氮,保持必要的样品冷冻研磨，以保证在不损坏RNA, 以达到顺利提取蛋白质的目的；


使用RM100和KM100的进行冷冻研磨的具体方法如下:


★ 将铬钢研钵和研槌用液氮预冷却一段时间；
★ 将酵母细胞从塑料注射器中注射到液氮中，使样品冻结成“面条"状；
★ 将液氮注射到研钵中，分别开启RM100和KM100，假如按需要预先裁切好的冷冻样品；
★ 酵母细胞在适度研磨压力下被磨成均匀的粉末；
★ 在整个研磨过程中，不断加入液氮以保持研磨温度；
★ 大约5到15分钟后（研磨时间取决于下一步萃取想要达到细胞浓度），即可用预冷的容器回收已破碎好的酵母细胞粉末，以便下一步的萃取处理。


应用领域:


酵母细胞萃取的技术在基因及相关分析的生物学领域中被广泛采用。并在大量的医学、制药、化学实验室研究中及食品营养工程技术中被采用。


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