产品简介：

细菌鞭毛蛋白可以作为疫苗佐剂，具有重要的应用价值。传统的纯化细菌鞭毛蛋白的  方法多需要使用超速离心或者层析交换，步骤非常繁琐，使用不便，为此本公司开发了不   需要超速离心和层析交换的细菌鞭毛蛋白快速纯化试剂盒。

产品特点：

1.只有洗涤和沉淀两步，简单快捷。

2.所得细菌鞭毛蛋白纯度高，完整性好。

3.回收效率高，一般能得到相当于总蛋白量 6%的鞭毛蛋白。

4.可用于Escherichiacoli，Salmonellatyphimurium，Salmonellatyphi，

Citrobacterfreundii等细菌。

5.本产品需要冷冻高速离心机。

6.本产品足够 20 次细菌鞭毛蛋白纯化，每次可以处理 1 L 饱和菌液。

7.细菌鞭毛蛋白纯化试剂盒只能用于科研。

产品参数：

本产品由一个扁盒和一个大立盒组成，大立盒包装，常温运输和保存

成分规格包装

10×细菌鞭毛蛋白纯化洗涤液250 mL250 mL 本色瓶

使用手册1 份1 份

本产品由一个扁盒和一个大立盒组成，大扁盒包装，常温运输和保存

成分规格包装

细菌鞭毛蛋白纯化沉淀剂250 g×2500 mL 干粉瓶

使用手册1 份1 份

运输及保存

常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂

超纯水、PBS 缓冲液（pH 7.4），透析耗材。

使用方法：

1.实验前取将适量的10×细菌鞭毛蛋白洗涤液用自备的超纯水稀释10 倍后得到1×细菌鞭毛蛋白洗涤液，放冰上待用。

2.收集 1 L 过夜培养的细菌饱和培养液（OD600 在 0.6 左右即可），5,000×g 室温离心 10 分钟后弃上清。

3.在细菌沉淀中加入 200 mL 自备的 PBS 缓冲液（pH 7.4），充分混匀得到细菌重悬液。

4.5,000×g 室温离心 10 分钟，小心弃除上清。

5.重复 3-4 步一次。

6.在细菌沉淀中加入 50 mL 1×细菌鞭毛蛋白洗涤液，充分混匀得到细菌重悬液。

7.将细菌悬浮液转移到 100 mL 烧杯中（或 100 mL 平底塑料平中）并放入磁力搅拌子，再将 100 mL 烧杯放到一个大烧杯（如 2 L 烧杯）中间，周边入碎冰固定小烧杯，然后将装有小烧杯的大烧杯放在磁力搅拌器上搅拌 30 分钟。

8.取出搅拌子，将细菌重悬液转移到离心管中，10,000×g 离心 20 分钟，小心收集含有细菌鞭毛蛋白的上清液。

9.将上清液转移到一个 100 mL 干净烧杯中并放入磁力搅拌子，再将 100 mL 烧杯放到一个大烧杯（如 2 L 烧杯）中间，周边入碎冰固定小烧杯，然后将装有小烧杯的大烧杯放在磁力搅拌器上缓慢搅拌。搅拌中加入细菌鞭毛蛋白纯化沉淀剂 23.6 g，待沉淀剂溶解后停止搅拌，静置 45 分钟。期间细菌鞭毛蛋白将形成沉淀。

10.取出搅拌子，将溶液转移到干净离心管中，4℃下 10,000×g 离心 10 分钟。

11.小心弃除上清，所得沉淀为细菌鞭毛蛋白。

12.由于所得细菌鞭毛蛋白含盐，所以用户需要采用过柱除盐法或透析除盐法除盐。由于  细菌鞭毛蛋白分子量在 15-40 Kd，所以需要据此选择合适截留孔径的透析袋，在合适透析液（根据后续实验确定）中进行过夜透析。本试剂盒不含相关试剂。

选择我们的细菌鞭毛蛋白纯化试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！