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產品簡介：

羥基萘酚藍（Hydroxy Naphthol Blue，HNB）的 CAS 號為 165660-27-5，其分子結構式如下：

羥基萘酚藍(HNB)是一種金屬離子指示劑,LAMP-HNB 的變色原理為:HNB 與鎂離子結合使得反應體系初始顏色為紫羅蘭色,隨著反應的進行,鎂離子與析出的焦磷酸根離子反應生成焦磷酸鎂沉淀,羥基萘酚藍失去了鎂離子使得體系顏色變?yōu)樘焖{色,而未反應的體系則仍保持著紫羅蘭色。另外,HNB 可以在 LAMP 反應前加入,有效的減少了反應污染的可能性。本產品就是專門用于 LAMP 擴增的羥基萘酚藍溶液，其濃度為 12 mM。

產品特點：

1.即開即用，可以直接加入到含 Mg 的 LAMP 擴增體系中使用。

2.本產品的最佳用量根據 LAMP 體系不同需要用戶自己優(yōu)先選擇，但一般終濃度為 25 ?M 左右， 需要終濃度為 0.5 mM 的 Mg 離子存在，并且 Mg 離子濃度跟標準 LAMP 反應的 Mg 離子濃度一樣。

3.本產品只能用于科研。

產品參數：

成份規(guī)格包裝

LAMP 專用羥基萘酚藍溶液，12mM

1 mL1.5 mL 棕色管

使用手冊1 份無

運輸及保存

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

無

使用方法：

1.將本產品放置在室溫融化 30 分鐘，震蕩 10 秒鐘，短暫離心后放冰上待用。

2.按下表設置 20 ?L 體系的 LAMP 反應：

成份樣品管陰性對照

4×LAMP Mix5?L5?L

自備 FIP 引物終濃度0.8 ?M0.8 ?M

自備 BIP 引物終濃度0.8 ?M0.8 ?M

自備 F3 引物終濃度0.2 ?M0.2 ?M

自備 B3 引物終濃度0.2 ?M0.2 ?M

自備 Loop F 引物終濃度（可選項）0.4 ?M0.4 ?M

自備 Loop B 引物終濃度（可選項）0.4 ?M0.4 ?M

自備模板 DNA1-100ng不加

Bst DNA 聚合酶(8U/?L)1.5 ?L1.5 ?L

自備 MgCl2 溶液，5 mM2 ?L2 ?L

加本產品到終濃度25 ??左右25 ??左右

補水到20 ?L20 ?L

3.65℃保溫 1 小時。

4.LAMP 擴增后用肉眼觀察，有核酸擴增的將變色，管中液體顏色由紫羅蘭色變?yōu)樘焖{色。沒有擴增的將不變色，管中液體顏色仍為紫羅蘭色。典型的實驗結果如下圖（左邊為陰性結果，右邊為陽性結果）：

5.也可以電泳檢測實驗結果（強烈不推薦此法，因為電泳時產生的氣溶膠非常容易污染環(huán)境，使得今后用同一引物擴增時產生假陽性）：取 5-10 ?L 擴增產物和自備的上樣液混合，上樣，進行 2-3%的瓊脂糖凝膠電泳，有 LAMP擴增的樣品將可見 LAMP 特征性電泳圖譜。

選擇我們的LAMP 專用羥基萘酚藍溶液，12mM，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！