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KTB1030-CN-CheKine 超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測(cè)試劑盒在化妝品抗氧化功效評(píng)估中的應(yīng)用

摘要

本研究利用 CheKine 超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測(cè)試劑盒評(píng)估化妝品的抗氧化功效。以體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞為模型，在過(guò)氧化氫誘導(dǎo)氧化應(yīng)激條件下，使用不同化妝品處理細(xì)胞，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) SOD 活性變化來(lái)評(píng)價(jià)化妝品的抗氧化能力。結(jié)果表明，該試劑盒能夠準(zhǔn)確反映化妝品對(duì)細(xì)胞 SOD 活性的影響，為化妝品研發(fā)過(guò)程中抗氧化成分篩選及功效評(píng)價(jià)提供了科學(xué)、便捷的檢測(cè)手段，助力提升化妝品質(zhì)量與安全性。

一、引言

化妝品的抗氧化功效是消費(fèi)者關(guān)注的重點(diǎn)之一，其可有效抵御皮膚氧化應(yīng)激損傷，延緩皮膚衰老。氧化應(yīng)激導(dǎo)致皮膚細(xì)胞內(nèi) ROS 增加，損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，而 SOD 作為細(xì)胞內(nèi)重要的抗氧化酶，其活性變化可直觀反映細(xì)胞氧化應(yīng)激狀態(tài)及化妝品的抗氧化效果。建立準(zhǔn)確有效的化妝品抗氧化功效評(píng)估方法對(duì)于保障消費(fèi)者權(quán)益、推動(dòng)化妝品行業(yè)發(fā)展具有重要意義。CheKine 超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測(cè)試劑盒為化妝品抗氧化功效評(píng)估提供了新的技術(shù)途徑。

二、材料與方法

1.細(xì)胞系與培養(yǎng)條件：選用人皮膚成纖維細(xì)胞系 HSF，在含 10% 胎牛血清、1% 雙抗（青霉素 - 鏈霉素）的 DMEM 培養(yǎng)基中，于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。

1.化妝品樣本準(zhǔn)備：收集市場(chǎng)上常見(jiàn)的不同品牌、不同類型（如面霜、精華液、乳液等）共 10 種化妝品，將其稀釋至合適濃度備用。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組（僅含培養(yǎng)基）和陽(yáng)性對(duì)照組（使用已知具有抗氧化功效的維生素 C 溶液）。

1.氧化應(yīng)激模型建立與化妝品處理：將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的 HSF 細(xì)胞接種于 96 孔板，待細(xì)胞貼壁后，用 0.5 mM 過(guò)氧化氫溶液處理細(xì)胞 2 小時(shí)，建立氧化應(yīng)激模型。隨后，分別加入不同化妝品溶液，繼續(xù)培養(yǎng) 24 小時(shí)。

1.樣本檢測(cè)：培養(yǎng)結(jié)束后，棄去培養(yǎng)基，用 PBS 緩沖液清洗細(xì)胞 3 次。每孔加入試劑盒提供的細(xì)胞裂解液，冰浴裂解 30 分鐘，4℃、12000 rpm 離心 15 分鐘，取上清用于 SOD 活性檢測(cè)。按照 CheKine 試劑盒說(shuō)明書(shū)，將細(xì)胞裂解上清與試劑混合，孵育后使用酶標(biāo)儀在 550 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算 SOD 活性。

1.功效評(píng)價(jià)指標(biāo)：以細(xì)胞 SOD 活性相對(duì)變化率作為化妝品抗氧化功效評(píng)價(jià)指標(biāo)，計(jì)算公式為：SOD 活性相對(duì)變化率（%）=（實(shí)驗(yàn)組 SOD 活性 - 氧化應(yīng)激對(duì)照組 SOD 活性）/（陽(yáng)性對(duì)照組 SOD 活性 - 氧化應(yīng)激對(duì)照組 SOD 活性）× 100%。

三、結(jié)果與分析

1.不同化妝品對(duì)細(xì)胞 SOD 活性影響差異顯著：經(jīng)檢測(cè)，不同化妝品處理后，細(xì)胞內(nèi) SOD 活性變化差異明顯。部分化妝品可顯著提高氧化應(yīng)激細(xì)胞的 SOD 活性，如某品牌精華液處理組 SOD 活性相對(duì)變化率達(dá)到 85%，接近陽(yáng)性對(duì)照組（維生素 C 組 SOD 活性相對(duì)變化率為 95%）；而部分化妝品處理組 SOD 活性提升不明顯，甚至低于氧化應(yīng)激對(duì)照組。

1.化妝品類型與抗氧化功效關(guān)系：對(duì)不同類型化妝品進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，含有多種植物提取物、抗氧化活性成分（如多酚、黃酮等）的面霜和精華液類化妝品，其提升細(xì)胞 SOD 活性效果較好；而部分基礎(chǔ)保濕乳液類化妝品抗氧化功效相對(duì)較弱。這表明化妝品的抗氧化功效與所含成分及配方密切相關(guān)。

1.試劑盒應(yīng)用效果驗(yàn)證：對(duì)同一樣本重復(fù)檢測(cè) 5 次，SOD 活性測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)小于 6%，表明該試劑盒重復(fù)性良好。與其他經(jīng)典抗氧化功效檢測(cè)方法（如 DPPH 自由基清除法）結(jié)果對(duì)比，相關(guān)性分析顯示兩者具有較高相關(guān)性（r > 0.90），進(jìn)一步驗(yàn)證了該試劑盒在化妝品抗氧化功效評(píng)估中的準(zhǔn)確性和可靠性。

四、結(jié)論

CheKine 超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測(cè)試劑盒可有效應(yīng)用于化妝品抗氧化功效評(píng)估。通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) SOD 活性變化，能夠直觀、準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)化妝品的抗氧化能力，為化妝品研發(fā)過(guò)程中抗氧化成分篩選、配方優(yōu)化及產(chǎn)品質(zhì)量控制提供了有力的技術(shù)支持，有助于推動(dòng)化妝品行業(yè)向更科學(xué)、更安全、更有效的方向發(fā)展。

技術(shù)支持

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