土壤羟胺还原酶（hydroxylamine reductase,HR）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/24 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

土壤羟胺还原酶能将土壤中氮代谢过程中形成的中间产物羟胺还原为氨，土壤中的还原态化合物可作为氢的供体，其强弱影响到土壤氮代谢过程中氮素的氨挥发损失，间接影响氮肥的利用效率。

测定原理：

硫酸铁铵中的Fe³⁺可将羟胺氧化为氮气，自身被还原为 Fe²⁺，Fe²⁺在弱酸条件下与邻菲罗琳形成橙红色配合物，在 510nm 处有吸收峰，羟胺还原酶作用于羟胺，使配合物形成量减少，510nm 处吸光值的减少可反映羟胺还原酶的活性。

土壤羟胺还原酶试剂盒 土壤系列-常备现货

试剂组成和配制：

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加 10ml 蒸馏水充分溶解。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

自备仪器和用品：

天平、常温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、震荡仪、氮吹仪。

样品处理：

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

测定操作表：

计算公式：

标准曲线：y = 0.185x -0.1828，R² = 0.9992

酶活定义：每克土壤每天转化 1μg 羟胺为一个酶活力单位。

HR 活性（μg/d /g 土样）=（△A+ 0.1828）÷ 0.185×V 反总÷W÷T= 181.62×（△A+0.1828）÷W V 反总：加入提取液体积，1.4ml；W：样本质量，g；T：1/24h

注意事项：

1. 土壤表层溶解氧浓度较大，取样应取表层 5cm 以下的土壤，否则酶活性较低或者测定不到。

2. 试剂三尽量不要敞口放置，取完立即加盖拧紧。

3. 反应体系最好能用氮吹仪排除溶解氧，若无此装置，则加入试剂三后立即密封，于 30℃反应 1h。

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