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上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年EC96194ClearColi K12電轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- EC96194 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：79更新時間：2025-04-21 12:29:50
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×50ul/100×50ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EC96194 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：EC96194
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×50ul/100×50ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
ClearColi K12電轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
ClearColi K12 感受態(tài)細胞用電擊法轉(zhuǎn)化的效率較高，故不推薦使用熱激法化學(xué)轉(zhuǎn)化。ClearColi K12
菌株來源于 K12 endArecA-菌株，并在其中引入突變，導(dǎo)致 ClearColi K12 細胞壁外層的脂多糖被修
飾（LPS 的低聚糖鏈被刪除，同時 LPS 的兩個酰基鏈也被刪除），進而破壞了 ClearColi K12 大腸
桿菌的內(nèi)毒素信號通路，使得從該細胞中提取的蛋白或質(zhì)粒 DNA 中的內(nèi)毒素含量極低，提取的無
內(nèi)毒素質(zhì)粒廣泛應(yīng)用于后續(xù)的哺乳動物細胞轉(zhuǎn)化。ClearColi K12 同時缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)和重組
酶 (recA)，提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量。吐露港生物開發(fā)的 ClearColi K12 電擊感受態(tài)細胞經(jīng)特
殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測的電轉(zhuǎn)化效率可達 107 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
ClearColi K12
電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞
10 × 50 μL
100 × 50 μL
定制
基因型：F- λ- ?endA ?recA frr181 msbA52 ?gutQ ?kdsD ?lpxL ?lpxM ?pagP ?lpxP ?eptA
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
電轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，轉(zhuǎn)入冰上預(yù)冷的電擊轉(zhuǎn)化杯中；
3. 使用電轉(zhuǎn)儀進行電擊轉(zhuǎn)化（轉(zhuǎn)化參數(shù)為：2 mm 電擊杯，2.5 kv，200 Ω，電轉(zhuǎn)化時間一般為 4-5
ms 左右）；
4. 電擊后迅速取出電擊杯，向其中加入 900 μL 液體 LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后
置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰上解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 不應(yīng)含有較高的離子強度，建議總體積不超過 5 μl，一般為 1-2 μl；
3. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，電轉(zhuǎn)化杯一定要在冰上預(yù)冷；
4. 如使用 1 mm 電擊杯，則轉(zhuǎn)化參數(shù)改為 1.25 kv 和 200 Ω。
ClearColi K12電轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
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