二手罗氏 LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪详尽介绍
一、引言
随着分子生物技术的广泛应用,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR, 简称qPCR)已成为核酸定量分析中常用的一种手段。罗氏公司推出的 LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪是一款中小通量的qPCR系统,专为日??蒲?、教学实验及基础临床研究而设计。相较新机,二手 LightCycler® 96 仪器因其成本较低、核心功能完整、维护便捷,成为众多实验室设备更新或扩充中的可选方案之一。
本文将从仪器组成、技术参数、应用场景、使用注意事项及选购建议等方面,对二手 LightCycler® 96 仪器进行系统性介绍。
二、系统构成
LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪整体结构简洁,易于操作与维护,主要包括:
主机本体
集成热循环??橛胗饧觳饽??,采用封闭箱体结构,减少环境干扰。样品支持系统
支持96孔标准qPCR反应板,样本容量灵活,适合常规样本量的实验设计。多通道荧光检测系统
配备4个荧光通道,可支持多种荧光染料与探针组合,适应不同实验需求。控制与分析软件
LightCycler® 96 软件界面友好,功能包括数据实时采集、Ct值分析、标准曲线绘制、熔解曲线生成等。配件与附件
包括样品离心板、压膜器、计算机连接线、校准卡与标准耗材组件等。
三、技术参数
项目 | 技术规格 |
---|---|
支持样本容量 | 96孔反应板 |
通量范围 | 1–96个样本/运行 |
荧光检测通道数 | 4通道(FAM, HEX, ROX, Cy5) |
支持染料 | SYBR Green I、TaqMan、FRET、Scorpion等 |
温控范围 | 37–99°C |
升温/降温速率 | 4.4°C/s / 2.2°C/s |
温度均一性 | ±0.2°C(30秒) |
最小检测拷贝数 | 1–10个拷贝 |
定量范围 | 101 – 10? 拷贝 |
操作系统兼容性 | Windows 10、Windows 11(视软件版本而定) |
四、主要功能与特点
1. 多色荧光检测
仪器配备四通道检测系统,能够实现最多四种不同靶标的同时检测,适用于双重或多重PCR反应方案。在诊断、基因分型或病原体筛查等多目标实验中有广泛适应性。
2. 快速热循环控制
得益于其精准的温控模块,LightCycler® 96 能在较短时间内完成一个完整的PCR循环,提升实验效率,尤其适合批量样本的日常分析需求。
3. 实时数据分析
软件可自动生成扩增曲线、标准曲线、熔解曲线、Ct值表格等数据,便于用户快速获得结果并作进一步分析。
4. 熔解曲线分析
支持常规与高分辨率(HRM)熔解曲线分析,用于检测基因突变、碱基多态性等小变异。
5. 操作简便
该仪器设计注重用户体验,软件界面清晰,参数设置合理,适合科研初学者及中级用户快速上手。
五、典型应用场景
1. 医学研究与分子诊断前期分析
基因表达水平定量(如癌症标志物表达)
病毒核酸检测(如HBV、HPV、SARS-CoV-2等)
微生物载量检测与抗药性基因分析
2. 药物筛选与药效验证
药物处理前后基因表达变化检测
信号通路相关基因的表达波动追踪
siRNA/miRNA作用机制评价
3. 动植物基因研究与转基因筛选
转基因作物的外源基因定量
物种溯源及遗传背景分析
植物病害相关基因表达水平研究
4. 教学与基础培训实验
qPCR基础技能培训
实验原理教学演示
实验设计与数据分析训练
六、二手设备的价值与使用建议
优势:
经济实用:适合预算有限的中小型实验室或教学单位。
性能可靠:核心温控与检测??槟陀?,经过保养后仍可长期运行。
结构紧凑:适合空间有限的实验环境布置。
维护成本低:维修配件易得,常规维护操作简单。
注意事项:
核查使用记录与保养情况:重点检查温控性能是否正常、荧光通道是否存在漏检或信号衰减问题。
校准状态与软件授权:是否附带原厂或第三方校准文件,软件是否具备完整授权。
兼容性问题:软件是否兼容当前操作系统,是否有配套硬件控制单元。
配件完整性:原配附件是否齐全,是否包含热盖、压膜器、适配器等核心组件。
七、操作与维护建议
日常操作注意事项:
使用前确保反应板密封良好,避免荧光信号泄漏。
实验前进行系统自检,确保光路与温控系统稳定。
建议定期进行阴性对照、重复孔设置以检测系统误差。
定期维护建议:
每次使用后清理样本托盘及热盖区域。
每3–6个月进行温控校准与光路检测,确保信号采集准确。
如长期不使用,应进行设备封存,并防止潮湿环境侵蚀电路部件。
八、选购二手 LightCycler® 96 的建议
优选来源可靠的正规供应商,如科研仪器回收商、二手医疗设备平台等,避免从来历不明渠道购入无售后保障的仪器。
建议要求试机演示,验证加热??椤⑺耐ǖ佬藕畔煊η榭黾叭砑僮鹘缑媸欠裾?。
若条件允许,可配合第三方检测机构进行校准与维护认证,确保仪器状态适用于科研与教学场景。
九、结语
LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪以其稳定的性能、简便的操作和灵活的软件支持,在基础研究、教学实验与初级临床应用中有着广泛的适用性。对于预算有限或寻求性价比解决方案的实验室而言,选购二手该型号设备是一种可行的选择。
通过规范的操作流程与合理的使用维护,即使是二手设备,也能够长期保持良好的检测状态,为科研与应用提供可靠数据支持。随着科研设备的可持续使用理念推广,二手 LightCycler® 96 有望继续在多个科研场景中发挥其作用。