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液相色譜儀操作注意事項

閱讀:583      發布時間:2024-10-8
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液相色譜儀基本操作流程:

一、開機

1.打開送液泵電源,打開排液閥(反時針旋轉180度),按purge鍵進行排氣泡的操作,確認輸液管路中無氣泡時停止該操作,將排液閥旋回到原位置。

2.設定流速,平衡柱子30分鐘[Fun]+“流速"+[enter]

3.打開測器電源,設定波長[Fun]+“波長"+[enter]+[CE]

4.打開工作站(積分儀),設定相關參數

二、進樣及數據采集

三、數據處理及打印報告

四、關機:

1.數據采集完畢即可關閉檢測器;

2.泵更換甲醇沖洗流路30分鐘(如使用緩沖鹽流動相請先用水沖洗流路10分鐘);

3.關泵

液相色譜儀基本操作注意事項:

1.流動相必須用HPLC(色譜)級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用045u或更細的膜過濾)。

2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使用。

3.不能純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

4.使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子(一小時),然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20以上。

5.長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有機相(如甲醇等),因為純水易長霉。

6.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

7.C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。

8.堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥查并清洗。

   清洗方法;①以異丙醇作溶劑沖洗:②放在異丙醇中間用超聲波清洗;用10%稀硝酸清洗。

9.氣泡會致使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。

10.如果進液管內不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。

11.要注意柱子的PH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。

12.更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊清洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡。


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