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细胞名称：CFPAC-1人胰腺导管癌细胞ATCC

背景：CFPAC-1是胰腺管腺癌细胞系，建自26岁白人男性囊性纤维变性（CF）的肝转移灶。 该细胞系表达囊性纤维变性跨膜调节因子（CFTR）。 形态为上皮样且顶端微绒毛极化。该细胞表达胰腺管细胞特征性的细胞角蛋白和癌胚抗原。倍增时间为30-32小时。 它是亚3倍体的细胞系，36％的细胞的染色体模式数为75。 该细胞传代至24代时在无胸腺小鼠中致瘤。

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS2836CNCI-H841人小细胞肺癌

YS2837CSU.86.86人胰腺导管癌细胞

YS2838CCOR-L279人肺小细胞

YS2839CCOLO-679人黑色素瘤细胞

YS2840CPSN1人胰腺癌细胞

YS2841CNCI-H2081人小细胞肺癌

YS2842CMT-2人淋巴瘤细胞

YS2843CKP4人胰腺癌细胞

YS2844CPAXC-002人源胰腺癌细胞

YS2845CPAXC-003人源胰腺癌细胞

YS2846CPAXC-008人源胰腺癌细胞

YS2847CPAXC-010人源胰腺癌细胞

YS2848CPAXC-011人源胰腺癌细胞

YS2849CPAXC-012人源胰腺癌细胞

YS2850CCOLO741人直肠癌细胞

YS2851CVMRC-RCZ人肾细胞

YS2852CRCM-1人胰腺癌细胞

YS2853CSW837人结直肠腺癌细胞

YS2854CNCI-H660人小细胞

YS2855CMDAPCa2b人前列腺癌细胞

YS2856CCFPAC-1人胰腺导管癌细胞

YS2857CHs840.T人乳头状瘤

YS2858CSKM-1人骨髓增生异常综合征细胞

YS2859CMIAPaCa-2人胰腺导管癌细胞

YS2860CLIXC-012人肝癌细胞

YS2861CIA-LM人大细胞

YS2862CKP-N-RT-BM-1人神经母瘤细胞

YS2863CU266B1人外周淋巴细胞

YS2865CHUP-T3人胰腺癌细胞

YS2866COE21人食道鳞状癌细胞

YS2867CTYK-nu人卵巢癌细胞

YS2868CTOV-21G人上皮性卵巢癌细胞

YS2869CCHL-1人黑色素瘤细胞

YS2870CHUP-T4人胰腺癌细胞

YS2871CBpRc1小鼠肝癌细胞

YS2872COVMANA人卵巢癌细胞

YS2873CLIXC-011人肝癌细胞

YS2874CLIXC-003人肝癌细胞

YS2875CLIC-0903LIC干细胞

YS2876CATN-1人T白血病细胞细胞

YS2877CKP-N-YN人平滑肌细胞

YS2878CC8-D1A[AstrocytetypeIclone]小鼠小脑细胞

YS2879CCOR-L105人原发性非小细胞肺癌

YS2880CBHK仓鼠肾成纤维细胞

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