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胚胎干細(xì)胞法處理方法

閱讀:506      發(fā)布時(shí)間:2024-4-24
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胚胎干細(xì)胞法處理方法

分離囊胚的內(nèi)細(xì)胞群(ICM)細(xì)胞,再進(jìn)行體外培養(yǎng)即可取得胚胎干細(xì)胞。目前,取得胚胎干細(xì)胞的方法已有一定改進(jìn),但仍無可避免地會(huì)

殺死胚胎。


囊胚由兩大部分構(gòu)成:處于外圍的滋養(yǎng)層以及處于內(nèi)部的內(nèi)細(xì)胞群。滋養(yǎng)層細(xì)胞會(huì)分化為胚胎外的組織(胎盤等),而內(nèi)細(xì)胞群則會(huì)分化為

胚胎的各種結(jié)構(gòu)。

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最早期分離胚胎干細(xì)胞的方法是先用蛋白酶分解透明帶的蛋白質(zhì)(囊胚外圍的一層細(xì)胞外基質(zhì)),再利用免疫手術(shù)(immunosurgery)

專一地使滋養(yǎng)層細(xì)胞裂解,從而取得內(nèi)部的內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞,之后體外培養(yǎng)和繁殖取得的內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞,即可建立胚胎干細(xì)胞系。目前胚胎

干細(xì)胞的分離方法已有了一定的改進(jìn),比如現(xiàn)在已有使用激光去除透明帶的技術(shù)。


獲取胚胎干細(xì)胞的成功率相當(dāng)?shù)?,即使成功取得胚胎干?xì)胞,維持其不分化的狀態(tài)也十分困難。為了阻止胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分化,

培養(yǎng)基需加入如白血病抑制因子(LIF)等因子。最初,胚胎干細(xì)胞需要在含有喂養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。喂養(yǎng)層細(xì)胞能為胚胎干細(xì)胞提供

特定的微環(huán)境,以抑制胚胎干細(xì)胞的分化。喂養(yǎng)層細(xì)胞常常使用經(jīng)過有絲分裂阻斷劑處理過的胚胎成纖維細(xì)胞。

目前已能在成分清楚、無異物、不含有血清以及喂養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)基上培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞。


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