ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)疑難問題解答
1.非正常的樣本值
①不正確的收集或保存
解決方案：確保正確的底物體積混合。如果底物是凍干粉，用相應(yīng)緩沖液重懸*，充分混合并在一定時間內(nèi)使用。
②不正確的樣本制備
說明書中樣本制備方法已經(jīng)過性能測試驗(yàn)證，嚴(yán)格按照說明書推薦進(jìn)行。確保使用正確的校正稀釋液。
2.信號強(qiáng)度增長不充分
①底物準(zhǔn)備有誤
解決方案：確保正確的底物體積并混合。如果底物是凍干粉，用相應(yīng)緩沖液重懸，充分混合并在一定時間內(nèi)使用。
②每孔底物添加體積有誤
解決方案：保證移液器正常工作，必要時進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
③孵育時間或溫度有誤
解決方案：嚴(yán)格按照推薦的孵育時間和溫度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，避免在環(huán)境條件變化的位置孵育96孔板（如放在通風(fēng)處或窗臺邊）。
④偶聯(lián)物或底物準(zhǔn)備有誤
解決方案：確保混合相同體積的偶聯(lián)物和底物。加入后會立即顯色。底物在使用前應(yīng)避光保存。
⑤儀器設(shè)置不正確
解決方案：確保酶標(biāo)儀使用了正確的濾光片，確保按照說明書，正確的配置儀器參數(shù)。
3.邊緣效應(yīng)
①工作臺溫度不均衡
解決方案：避免在環(huán)境條件變化的位置孵育，如放在通風(fēng)處或窗臺邊。
②體系液體蒸發(fā)
解決方案：保證移液器正常工作，必要時進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
③疊板孵育時避免疊板。