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HG-TP001-2G-T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒(2G)
  • HG-TP001-2G-T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒(2G)

貨物所在地:天津天津市

更新時間:2025-05-26 16:06:41

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BlueKit系列T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒(2G)采用雙抗夾心法定量檢測RNA藥物工藝中添加的T7 RNA Polymerase酶殘留含量。柏萊源生物為譜新生物代理商,具體產(chǎn)品價格與技術問題等信息咨詢,請聯(lián)系我們!

    T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒說明(2G)明書


HG-TP001-2G

T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒(2G)

產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測(ELISA)法,將T7 RNA Polymerase標準品和待測樣本加入預包被抗T7 RNA Polymerase抗體的酶標板,然后加入稀釋后的生物i素標記的檢測抗體和Streptavidin-HRP,形成抗體+抗原+抗體‐Biotin+ SA‐HRP復合物,洗板后加入TMB顯色液顯色。TMB在HRP酶的催化下由無色轉(zhuǎn)化成藍色并在終止液的作用下最終轉(zhuǎn)化成黃色。黃色的深淺與樣本中被檢測到的T7 RNA Polymerase的量呈正相關。

檢測范圍:0.25 ~ 16 ng/mL
定  量  限:0.25 ng/mL
檢  測  限:0.012 ng/mL
精  密  度:CV% < 10%, RE% < 士15%

規(guī)格:

96T

應用:

適用于生物制品純化工藝過程的優(yōu)化、中間工藝過程的雜質(zhì)控制以及終產(chǎn)品的放行檢測。

試劑盒組成:

組分規(guī)格配制
標準品(Standard)32 ng×6管建議按稀釋方式操作
包被酶標板(Coated Plate)8孔×12條即用型
樣品稀釋液(Sample Diluent Buffer)15mL×4瓶即用型
濃縮洗液(Wash Buffer 10×)50 mL×1瓶用去離子水進行10倍稀釋
檢測抗體(Detection Antibody 100×)65μL×1管用抗體稀釋液進行100倍稀釋
抗體稀釋液(Antibody Diluent Buffer)12 mL×1瓶即用型
TMB顯色液(TMB Substrate)12 mL×1瓶即用型
終止液(Stop Solution)12 mL×1瓶即用型
封板膜(Sealing film)5張即用型
說明書1份即用型


備 注:未開封試劑盒,在2~8℃條件下有效期為12個月。




需自行準備的材料

◆酶標儀

◆去離子水

◆微孔板恒溫振蕩器

◆全新濾紙

◆微量移液器及吸頭

◆渦旋振蕩器


實驗前準備

1.所有試劑以及待測樣本需要恢復室溫(18~25°C)。所有試劑現(xiàn)配現(xiàn)用

2.1×洗液配制:濃縮洗液平衡至室溫(18~25℃),不要有結(jié)晶。混勻后根據(jù)用量,取適量去離子水按1:9的比例,將10×洗液稀釋10倍,最終得到1×洗液。

3.1×檢測抗體配制:計算實驗所需工作液體積,取適量100×檢測抗體,用抗體稀釋液按1:99稀釋,充分混勻備用。

4.標準品的配制:取一支標準品,加200 μL去離子水,渦旋混勻,終濃度為160 ng/mL;取60uL濃度為160ng/mL標準液,加至540uL樣品稀釋液,渦旋混勻,終濃度為16ng/mL,用移液器將300uL樣品稀釋液移至每個離心管中,再按照下圖進行1:1梯度梯度稀釋。

5. 樣品使用樣品稀釋液進行稀釋,稀釋后的樣品即為:樣品稀釋工作液。


T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒(2G)

操作步驟

使用前所有試劑組分以及待測樣本需要恢復室溫(18~25°C)。建議所有的標準品和待檢樣本進行雙復孔測定。


1.使用前,將所有試劑充分混勻,避免產(chǎn)生氣泡。

2.根據(jù)實驗孔數(shù)量,確定所需的板條數(shù)目,剩余板條放回鋁箔袋,密封。

3.加樣與檢測抗體工作液:每孔加入100μL標準品、樣品稀釋工作液、陰性對照至相應孔中。每孔加1x檢測抗體50uL。用封板膜封板后置37°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱,600-800rpm,溫育60分鐘。

4.洗滌:棄去各孔內(nèi)液體,用1x洗液注滿微孔(300 uL/孔),靜置30秒后棄去孔內(nèi)液體;重復3次,每一次洗板完成后在濾紙上拍干。

5.顯色:每孔分別加100 μL底物顯色液,輕微振蕩混勻后用封板膜封板置25℃℃顯色15分鐘。

6.測定:每孔加終止液100 L,輕微混勻。選擇酶標儀主波長450nm,參考波長630nm,測定各孔吸光值(OD值)。

結(jié)果處理

1.標準曲線OD處理(見下例,僅為示例,具體以實際測定為準)


標準品濃度(ng/mL)OD1OD2平均值
16 2.8708 2.9433 2.9071
8 2.0941 2.0731 2.0836
4 1.2382 1.2562 1.2472
2 0.7254 0.6866 0.7060
1 0.3880 0.3634 0.3757
0.5 0.2124 0.1877 0.2001
0.25 0.1233 0.117 0.1202
0.00 0.0393 0.0422 0.0408










2.標準品理論濃度與對應OD值以四參數(shù)進行擬合,得到標準曲線(如下圖所示)。

T7 RNA Polymerase ELISA 檢測試劑盒(2G)

注意事項

1.樣品首i次檢測,建議進行至少3個連續(xù)倍數(shù)的稀釋,以在標曲范圍內(nèi)產(chǎn)生至少一個稀釋后樣品。

2.試劑按標簽說明儲存,使用前室溫平衡。

3.包被酶標板使用前請平衡至室溫再打開外包裝袋,實驗中不用的板條立即放回包裝中密封,4℃可保存一個月。其他不用的試劑應包裝好或蓋好。

4.實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

5.使用前檢查試劑盒內(nèi)各種試劑。試劑的稀釋、加樣和終止反應應充分混勻或搖勻?qū)嶒灲Y(jié)果尤為重要。

6.洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在潔凈的紙巾上充分拍干,直至看不到水印。勿將紙巾放入反應孔中吸水。

7.底物顯色液對光敏感,避免長時間暴露于光下,避免與金屬接觸影響結(jié)果。

8.本產(chǎn)品為一次性使用的試劑盒,請在效期內(nèi)使用。


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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢:

現(xiàn)貨供應:公司庫存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時間。

效期保障:嚴格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結(jié)果的可靠性。

專業(yè)技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優(yōu)化實驗條件,提高實驗成功率。

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