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手性柱通過手性固定相與手性化合物分子之間的相互作用實現(xiàn)手性識別。這種相互作用包括氫鍵、偶極-偶極作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用等多種類型。這些作用力雖然微弱，但通過影響包埋復(fù)合物的形成和特殊位點與分析物的鍵合，共同作用于手性分離效果。
手性柱的使用注意事項：
流動相的選擇：流動相中不能含有無機酸、無機堿，也不能使用不含銅離子的鹽，以防止損壞設(shè)備。同時，流動相必須采用預(yù)混合方式走等度，避免在線混合方式。
pH值的控制：手性柱的使用應(yīng)避免在pH低于4.0或高于7.0的條件下進行，最佳pH范圍為4.0～7.0。強堿性溶液的導(dǎo)入尤其容易導(dǎo)致手性柱不可逆損壞。
流速與柱壓：流速一般不大于0.8ml/min，柱壓應(yīng)控制在50bar～100bar之間，以防超過色譜柱使用壓力上限。
柱的預(yù)處理與保養(yǎng)：新柱使用前需用合適的溶劑沖洗流路，并在使用過程中注意定期沖洗和保養(yǎng)，以延長柱的使用壽命。
樣品的溶解：樣品必須用水或流動相溶解，避免使用可能破壞手性固定相的溶劑。
