同位素內(nèi)標(biāo)是一種在分析化學(xué)中廣泛應(yīng)用的定量分析技術(shù),其核心原理是通過引入與目標(biāo)分析物化學(xué)結(jié)構(gòu)高度相似但含有穩(wěn)定同位素標(biāo)記(如²H、¹³C、¹?N等)的內(nèi)標(biāo)物,校正分析過程中的誤差,提升定量準(zhǔn)確性。
在樣品前處理、色譜分離和質(zhì)譜檢測過程中,目標(biāo)分析物可能因基質(zhì)效應(yīng)、儀器波動(dòng)、回收率差異等因素導(dǎo)致定量誤差。同位素內(nèi)標(biāo)物與目標(biāo)分析物經(jīng)歷相同的處理過程,其響應(yīng)變化可以反映目標(biāo)分析物的損失或變化,從而通過比值計(jì)算校正誤差。
化學(xué)結(jié)構(gòu)相似性
同位素內(nèi)標(biāo)與目標(biāo)分析物具有相同的化學(xué)結(jié)構(gòu),僅在部分原子(如氫、碳、氮)上被同位素取代(如氘代氫、¹³C替代¹²C)。這種相似性確保了兩者在樣品前處理、色譜分離和離子化過程中行為一致。
質(zhì)譜區(qū)分性
由于同位素的質(zhì)量差異,內(nèi)標(biāo)與目標(biāo)分析物在質(zhì)譜中產(chǎn)生可區(qū)分的離子峰(通常質(zhì)量差為1-3 Da)。通過比較兩者的峰面積或峰高,可消除基質(zhì)效應(yīng)、儀器波動(dòng)等干擾,實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量。
同位素內(nèi)標(biāo)的優(yōu)點(diǎn)
高準(zhǔn)確性:
同位素內(nèi)標(biāo)物與目標(biāo)分析物具有相同的化學(xué)性質(zhì)和相似的色譜行為,能夠有效校正基質(zhì)效應(yīng)和儀器波動(dòng),提高定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
高靈敏度:
質(zhì)譜分析對(duì)同位素標(biāo)記物的檢測具有高靈敏度,適用于痕量分析。
廣泛適用性:
同位素內(nèi)標(biāo)技術(shù)適用于多種分析方法,如液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)等。
減少基質(zhì)效應(yīng):
基質(zhì)效應(yīng)是分析化學(xué)中常見的干擾因素,同位素內(nèi)標(biāo)物能夠模擬目標(biāo)分析物的行為,有效抵消基質(zhì)效應(yīng)的影響。
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