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新霉素-過氧化物酶標記物(Neomycin-HRP Conjugate)是一種將新霉素(Neomycin)與辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)通過化學交聯(lián)形成的標記物,在生物醫(yī)學研究和免疫檢測中具有重要應(yīng)用價值。以下是關(guān)于其組成、特性、應(yīng)用及儲存條件的詳細介紹:
新霉素(Neomycin):由弗氏鏈霉菌(Streptomyces fradiae)產(chǎn)生的一種氨基環(huán)多醇復合抗生素,由A、B和C組成,產(chǎn)品主要為新霉素B和C的混合物。新霉素與鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素同屬于氨基糖苷類抗生素,但其在核糖體上的作用靶位與鏈霉素不同,能引起細菌蛋白質(zhì)合成時mRNA讀碼框架的錯位造成錯讀,抑制蛋白質(zhì)合成的啟動和肽鏈的延長。
辣根過氧化物酶(HRP):一種含鐵卟啉輔基的氧化還原酶,能催化過氧化氫(H?O?)氧化多種底物,產(chǎn)生顏色變化或化學發(fā)光,用于信號放大和檢測。
偶聯(lián)物(Neomycin-HRP):通過化學交聯(lián)技術(shù)將新霉素與HRP結(jié)合,形成穩(wěn)定的復合物,保留了新霉素的抗原性和HRP的催化活性。
雙重功能:
抗原性:保留新霉素的特異性抗原表位,可被抗新霉素抗體識別。
催化活性:HRP能催化過氧化氫分解,同時氧化底物(如TMB、OPD)產(chǎn)生顏色變化,用于信號放大和檢測。
溶解性與穩(wěn)定性:
溶于PBS(pH7.4)等緩沖液,蛋白濃度≥1mg/ml。
含穩(wěn)定劑(如BSA)以防止變性,可在適當條件下長期保存。
檢測靈敏度:
經(jīng)稀釋后可用于ELISA檢測,效價≥1:3000,可靈敏檢測生物樣本中的新霉素含量。
抗體制備:
作為抗原免疫動物,制備抗新霉素抗體,用于研究新霉素的生理功能及疾病狀態(tài)下的水平變化。
免疫檢測:
建立ELISA等方法,定量檢測血清、血漿、尿液等生物樣本中的新霉素濃度,為臨床診斷、疾病監(jiān)測和藥物療效評估提供依據(jù)。
由于新霉素的抗性質(zhì)粒常被用作分子克隆中的選擇基因或標記基因,因此該標記物也可用于相關(guān)分子生物學研究。
藥物研發(fā):
作為標準品或?qū)φ掌?,評估藥物的活性和特異性,如藥物與新霉素受體的結(jié)合能力、親和力等。
溫度:建議-20℃或以下低溫保存,以避免蛋白質(zhì)變性或降解。同時,應(yīng)避免反復凍融或在4℃以上長時間放置。
操作規(guī)范:僅供科研使用,不能用于人體。在使用過程中,應(yīng)遵循相關(guān)的操作規(guī)程和安全指南,確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。
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