ONPG

MCE 国际站：ONPG

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-15926

CAS：369-07-3

中文名称：2-硝基苯基 β-D-半乳吡喃糖苷

Synonyms：2-硝基苯基 β-D-半乳吡喃糖苷; 2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside

纯度：99.84%

存储条件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年溶剂中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：ONPG 是一种比色和分光光度计底物，用于检测 β-半乳糖苷酶活性。

生物活性：ONPG 是一种用于检测 β-半乳糖苷酶活性的比色和分光光度底物。体外该酶对 ONPG 显示出高水解能力 (100%)，对其天然底物乳糖 (25.7%) 显示出中等活性。然而，该酶对所有其他显色硝基苯基类似物的水解能力非常弱，表明 Gal308 是一种具有窄底物特异性的 β-半乳糖苷酶。研究重组酶的动力学参数、Michaelis-Menten 常数 (K_m)、转换数 (k_cat) 和催化效率 (k_{cat< /sub>/K_m) 的 Gal308 用于 ONPG 和乳糖。 ONPG的k_cat和K_m值为464.7±7.8 s^-1和2.7±0.3 mM，ONPG为264.2±2.1 s-1 和 7.1±0.8 mM。 ONPG酶的k_cat/K_m值(172.1 s^-1mM^-1)为比乳糖高4.6倍（37.2 s^-1mM^-1），清楚地表明Gal308对ONPG的催化效率远高于乳糖^[1]。}

激酶实验：本研究使用 ONPG 和乳糖两种底物来测量 β-半乳糖苷酶活性。通过跟踪 ONPG 释放的邻硝基苯酚的量来测量 ONPG 的 β-半乳糖苷酶活性。反应混合物由 100 μL 酶溶液和 400 μL ONPG 溶液（2.5 g/L，100 mM Tris-HCl 缓冲液，pH 6.8）组成。在 78°C 下孵育 15 分钟后，通过添加等体积的 1 M Na2CO3 终止反应。通过测量 A405 定量测定释放的邻硝基苯酚。一个活性单位定义为在测定条件下每分钟产生 1 μmol 邻硝基苯酚所需的酶量。比活度以每毫克蛋白质的单位数表示。乳糖活性测定在含有 100 μL 酶溶液和 5% 乳糖的相同缓冲液中进行，煮沸 10 分钟终止反应，使用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶测定试剂盒测定葡萄糖浓度。通过测量 A492 定量测定释放的葡萄糖。一个酶活性单位定义为每分钟释放 1 μmol 葡萄糖所需的活性量[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

参考文献：

[1]. Zhang X, et al. Metagenomic approach for the isolation of a thermostable β-galactosidase with high tolerance of galactose and glucose from soil samples of Turpan Basin. BMC Microbiol. 2013 Oct 24;13:237. doi: 10.1186/1471-2180-13-237.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种*仅有化合物库，我们致力于为*科研客户提供前沿的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药patent收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪新的制药及生命科学研究进展，为您提供世界新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及有名科研机构建立了长期的合作。