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中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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細(xì)胞成像相關(guān)
肌肉組織力學(xué)
生物制造

細(xì)胞牽引力顯微鏡技術(shù)(traction force microscope, TFM)

時(shí)間:2023/5/29閱讀:1512
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細(xì)胞力學(xué)已從研究單個(gè)細(xì)胞力學(xué)性質(zhì)逐漸發(fā)展到關(guān)注細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基底的相互作用。了解

細(xì)胞如何產(chǎn)生和感知力,以及這些力如何轉(zhuǎn)化為生化信號(hào),對(duì)于解決關(guān)于正常和病理狀態(tài)下細(xì)胞行為的基本問(wèn)題至關(guān)重要。如何精確地測(cè)量細(xì)胞對(duì)外界施加的力同樣成為了生物力學(xué)研究中的關(guān)鍵問(wèn)題。

細(xì)胞與外基質(zhì)相互作用產(chǎn)生的主動(dòng)作用力叫牽引力,對(duì)其進(jìn)行表征可以使用TFM,該技術(shù)主要是由測(cè)量細(xì)胞外彈性基質(zhì)的變形得到應(yīng)變場(chǎng),再通過(guò)反演算法重構(gòu)細(xì)胞所產(chǎn)生的牽引力。將為許多牽引力失衡所導(dǎo)致的疾病(如癌癥、組織纖維化、動(dòng)脈粥樣硬化等)的機(jī)理探究、診斷與治療提供重要的理論支撐和檢測(cè)、治療依據(jù)。

TFM示意圖.JPG

TFM基本原理是將細(xì)胞培養(yǎng)在彈性模量已知且預(yù)先有熒光示蹤粒子標(biāo)記的基底上,當(dāng)細(xì)胞收縮時(shí)會(huì)牽引基底產(chǎn)生變形,細(xì)胞所施加的這種機(jī)械力與基底的變形符合彈性力學(xué)基本假設(shè),利用激光共聚焦顯微鏡記錄熒光示蹤顆粒的位移變化,即可得到基底的彈性變形程度,最終通過(guò)反演算法就能得到細(xì)胞施加的牽引力數(shù)據(jù)。該技術(shù)對(duì)于研究微環(huán)境對(duì)細(xì)胞的貼壁、遷移、生長(zhǎng)分化等生理學(xué)功能的影響有極大幫助。

由于熒光微珠分布隨機(jī),常用的基底位移場(chǎng)的提取方法大致上可以分成兩類,分別是基于模式識(shí)別技術(shù)的熒光粒子位移跟蹤方法和數(shù)字圖像處理相關(guān)方法。

具體方法是利用模式識(shí)別技術(shù)對(duì)變形前后圖像中的熒光微珠的位置信息進(jìn)行匹配,或計(jì)算變形前后圖像兩個(gè)子區(qū)域的互相關(guān)系數(shù),對(duì)兩張圖像中的熒光微珠進(jìn)行匹配,來(lái)獲得基底的位移場(chǎng)。對(duì)于圖形化彈性基底方法而言,由于基底表面的微凸臺(tái)陣列是呈周期性規(guī)律分布的,且凸臺(tái)的位移小于凸臺(tái)分布的空間周期,故無(wú)需復(fù)雜的圖像匹配算法,只需通過(guò)圖像處理計(jì)算基底受力前后兩張圖像中各凸臺(tái)的中心坐標(biāo),將相同凸臺(tái)受力前后的中心坐標(biāo)做差,獲得各凸臺(tái)的位移矢量,即可完成基底位移場(chǎng)的提取。

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