鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法（Proximity Labeling Mass Spectrometry, PLMS）是用于研究dànbáizhì相互作用和dànbáizhì在細(xì)胞內(nèi)空間分布等的技術(shù)。其基本原理是通過(guò)標(biāo)記鄰近的生物分子，以便于后續(xù)的質(zhì)譜分析識(shí)別和量化。鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法結(jié)合了化學(xué)標(biāo)記與高分辨率質(zhì)譜的優(yōu)勢(shì)，能夠識(shí)別dànbáizhì間的相互作用、dànbáizhì的空間定位以及動(dòng)態(tài)變化等信息。鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法的核心在于“鄰近標(biāo)記"這一步驟。通過(guò)將標(biāo)記分子與特定的蛋白或核酸相結(jié)合，利用生化反應(yīng)使得標(biāo)簽分子在一定的空間范圍內(nèi)展開(kāi)，并對(duì)鄰近的目標(biāo)分子進(jìn)行標(biāo)記。隨后，這些被標(biāo)記的分子通過(guò)質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)和分析。這一技術(shù)步驟的關(guān)鍵在于標(biāo)記反應(yīng)的高效性和特異性，以確保目標(biāo)分子的準(zhǔn)確標(biāo)記及后續(xù)的jīngquè檢測(cè)。通過(guò)鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜生物樣本中低豐度dànbáizhì的高靈敏度檢測(cè)，同時(shí)提供豐富的定量及定性信息。

鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法的應(yīng)用領(lǐng)域極其廣泛。例如，在癌癥研究中，這種技術(shù)可以用于解析癌細(xì)胞特異性dànbáizhì相互作用網(wǎng)絡(luò)，為靶向治療提供潛在的藥物靶標(biāo)；在神經(jīng)科學(xué)中，該方法能夠幫助研究人員揭示神經(jīng)細(xì)胞的通訊機(jī)制和突觸連接的動(dòng)態(tài)變化；在免疫學(xué)研究中，鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法可用于研究免疫細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)路徑，從而提高對(duì)免疫反應(yīng)機(jī)制的理解。此外，該技術(shù)在新型診斷標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)、疫苗開(kāi)發(fā)以及環(huán)境科學(xué)中也展現(xiàn)出潛力。

一、常用的鄰近標(biāo)記方法

1、shēngwùsù連接酶介導(dǎo)的鄰近標(biāo)記（BioID）

將目標(biāo)蛋白與shēngwùsù連接酶 BirA融合表達(dá)，BirA可以將shēngwùsù標(biāo)記到與其空間距離較近（一般在 10 納米左右）的dànbáizhì上。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的標(biāo)記后，細(xì)胞內(nèi)與目標(biāo)蛋白鄰近的dànbáizhì被shēngwùsù標(biāo)記，然后利用鏈霉親和素磁珠富集shēngwùsù標(biāo)記的dànbáizhì，再通過(guò)質(zhì)譜分析鑒定這些dànbáizhì。

2、過(guò)氧化物酶介導(dǎo)的鄰近標(biāo)記（APEX）

將目標(biāo)蛋白與過(guò)氧化物酶 APEX 融合，APEX 在過(guò)氧化氫存在的條件下，能將shēngwùsù - 酚等底物氧化成具有活性的中間體，這些中間體可以與鄰近的dànbáizhì上的氨基酸殘基發(fā)生共價(jià)結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)鄰近dànbáizhì的shēngwùsù標(biāo)記。后續(xù)同樣通過(guò)鏈霉親和素磁珠富集和質(zhì)譜分析來(lái)鑒定標(biāo)記的dànbáizhì。

二、鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法實(shí)驗(yàn)流程

1、構(gòu)建融合蛋白表達(dá)載體

將編碼目標(biāo)蛋白的基因與編碼標(biāo)記酶（如 BirA * 或 APEX）的基因連接，構(gòu)建成融合蛋白表達(dá)載體。

2、細(xì)胞轉(zhuǎn)染或基因表達(dá)

將構(gòu)建好的融合蛋白表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞中，使融合蛋白在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。

3、標(biāo)記反應(yīng)

加入相應(yīng)的標(biāo)記底物和輔助試劑，如在 BioID 中加入shēngwùsù，在 APEX 中加入過(guò)氧化氫和shēngwùsù - 酚等，讓標(biāo)記酶催化標(biāo)記反應(yīng)，使鄰近目標(biāo)蛋白的dànbáizhì被標(biāo)記。

4、dànbáizhì富集與純化

利用鏈霉親和素磁珠等方法，特異性地富集shēngwùsù標(biāo)記的dànbáizhì，并進(jìn)行純化，去除未標(biāo)記的dànbáizhì和其他雜質(zhì)。

5、質(zhì)譜分析

將純化后的dànbáizhì樣品進(jìn)行質(zhì)譜分析，通過(guò)質(zhì)譜儀檢測(cè)dànbáizhì的質(zhì)量和序列信息，再與dànbáizhì數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，鑒定出被標(biāo)記的dànbáizhì。

與傳統(tǒng)的dànbáizhì相互作用研究方法（如酵母雙雜交、免疫共沉淀等）相比，鄰近標(biāo)記質(zhì)譜法可以在細(xì)胞內(nèi)原位進(jìn)行標(biāo)記，更能反映dànbáizhì在天然狀態(tài)下的相互作用和空間分布情況，能夠提供dànbáizhì的空間分布信息。百泰派克生物科技提供zhuānyè的鄰近標(biāo)記質(zhì)譜分析服務(wù)，致力于幫助研究人員實(shí)現(xiàn)復(fù)雜生物樣本的高效分析。我們的團(tuán)隊(duì)擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)，能夠?yàn)榭蛻籼峁┝可矶ㄖ频慕鉀Q方案，并保證結(jié)果的高度準(zhǔn)確性和可靠性。歡迎各界科研人員與我們合作，共同探索生命科學(xué)的奧秘。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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