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當(dāng)前位置:北京百泰派克生物科技有限公司>>檢測技術(shù)服務(wù)>>蛋白分析>> 如何選擇Orbitrap與FT-ICR進
產(chǎn)品型號
品 牌百泰派克
廠商性質(zhì)其他
所 在 地北京市
更新時間:2025-07-24 10:07:20瀏覽次數(shù):45次
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在Bottom-Updànbáizhì組學(xué)中,高分辨質(zhì)譜(HRMS)是解析復(fù)雜肽段混合物的關(guān)鍵工具。兩大主流平臺——Orbitrap和FT-ICR(傅里葉變換離子回旋共振)質(zhì)譜——常被用于實現(xiàn)高分辨率和高質(zhì)量數(shù)據(jù)采集。但面對不同實驗需求和預(yù)算約束,如何在二者之間做出科學(xué)選擇?
一、Orbitrap 與 FT?ICR 的原理與技術(shù)差異
在Bottom?Updànbáizhì組學(xué)分析中,高分辨、高質(zhì)量精度以及高通量是質(zhì)量分析儀(MS)所追求的核心指標(biāo)。Orbitrap與FT?ICR作為兩類主流高分辨率質(zhì)譜平臺,盡管都能實現(xiàn)優(yōu)異的性能,但其底層原理和實際應(yīng)用場景存在明顯差異。
1、核心測量原理
Orbitrap:基于離子振蕩頻率的電勢井測量
Orbitrap 儀器內(nèi)部結(jié)構(gòu)采用同軸雙電極構(gòu)成,中間形成一個電勢“陷阱"。帶電肽段離子在電勢井中被捕獲后,會圍繞軸心發(fā)生振蕩。通過檢測振蕩頻率并進行傅里葉變換,即可反推出其質(zhì)量電荷比(m/z)信息。關(guān)鍵特點包括:
(1)離子穩(wěn)態(tài)振蕩:Orbitrap 中的離子振蕩頻率隨著 m/z 的變化而變化,該頻率極其穩(wěn)定。
(2)傅里葉變換處理:振蕩信號被快速傅里葉變換(FT)解碼,還原出 m/z 譜圖。
(3)儀器簡潔度:無需超導(dǎo)磁體,結(jié)構(gòu)相對緊湊,易于維護。
FT?ICR:基于離子回旋頻率的超高分辨率測量
FT?ICR 質(zhì)譜以精密的超導(dǎo)磁體為核心,離子在jígāo強度磁場作用下發(fā)生回旋運動。其關(guān)鍵原理為:
(1)離子回旋運動:當(dāng)帶電粒子進入強磁場,會以其 m/z 決定的回旋頻率在圓形軌道運行。
(2)超導(dǎo)磁體穩(wěn)定磁場:通常使用 7–12 特斯拉級別磁體,保證磁場高且穩(wěn)定。
(3)高精度 FT 采樣:同樣通過采集時間信號并進行傅里葉變換,分析 m/z 分布,但分辨率可達(dá) 10^6–10^7 級。
2、分辨率與質(zhì)量精度對比
Orbitrap以其平衡性能,在多數(shù)蛋白組學(xué)、修飾分析、肽段定量中已成為主流。FT?ICR則代表質(zhì)譜技術(shù)的極限,適用于解析極復(fù)雜同位素峰型以及高復(fù)雜度樣品。
3、樣品適用范圍與環(huán)境要求
Orbitrap
(1)應(yīng)對 Bottom?Up 肽段復(fù)雜樣本表現(xiàn)良好,尤其在 DDA、DIA、TMT 等定量策略下,高通量是其優(yōu)勢。
(2)樣品投入要求精細(xì),但前處理較常規(guī),無需額外環(huán)境控制。
(3)維護頻率低,適合制程繁忙的實驗室環(huán)境。
FT?ICR
(1)借助jígāo分辨率,可拆解多個相近 m/z 峰,提高同位素準(zhǔn)確度,適合代謝物分析、天然產(chǎn)物化學(xué)研究。
(2)對環(huán)境要求高:磁屏蔽、電力穩(wěn)定、液氮冷卻等。
(3)操作復(fù)雜,需要zhuānyè技術(shù)支持和維護團隊。
4、成本與實驗室投入比較
5、數(shù)據(jù)處理與分析生態(tài)
(1)Orbitrap 平臺配套成熟,主流 PEAKS、MaxQuant、Proteome Discoverer 等軟件均適配,支持底層 DIA、PTM 搜索等流程。
(2)FT?ICR 數(shù)據(jù)集因精度高,對同分異構(gòu)體、同位素峰型復(fù)雜樣本也有專用解析算法(如 ICR?2LS、Composer)。
(3)數(shù)據(jù)體量方面,Orbitrap 更適合大規(guī)模 cohort 建立;FT?ICR 數(shù)據(jù)處理要求較高,適合專案型研究。
二、如何基于研究目標(biāo)選擇質(zhì)譜平臺
選擇合適質(zhì)譜平臺的關(guān)鍵在于“用研需求和預(yù)算匹配"。以下結(jié)合不同科研場景,提供決策參考。
1、大規(guī)模dànbáizhì定量研究(如 TMT/LFQ/DIA)
核心需求:高通量、重現(xiàn)性、成本效率、可擴展樣本處理能力。
推薦平臺:Orbitrap(如 Exploris 480 或 Astral)
原因解析:
* 掃描速度快,支持短梯度 LC 和 DDA/DIA 流程。
分辨率與質(zhì)量精度足以處理磷酸化、糖基化等修飾肽段。
儀器穩(wěn)定性高,適合長周期數(shù)據(jù)積累。
本金預(yù)算相對經(jīng)濟,易于部署多個副機以擴容。
2、細(xì)胞信號通路分析、低豐度PTM搜索
核心需求:高敏感度、突出低豐度修飾、jīngquè質(zhì)量偏差。
推薦平臺:Orbitrap 中g(shù)āoduān型號(如 Orbitrap Eclipse、Odyssey 或 Astral)
原因解析:
* 兼顧靈敏度與精度,支持 PRM/SPS-MS^3 等深度修飾定位流程。
數(shù)據(jù)處理兼容性高,可與 PTM 專用軟件(比如 ptmRS)結(jié)合。
3、同位素示蹤、代謝流(Metabolic Flux)研究
核心需求:高準(zhǔn)確度同位素精度、良好譜圖線性度與分辨率。
推薦平臺:FT?ICR(尤其 7–12 T 系統(tǒng))
原因解析:
* 可解析極細(xì)同位素質(zhì)量差,確保jīngquè測定 13C、15N 分布。
對復(fù)雜底物混合物進行代謝路徑定量尤其有優(yōu)勢。
長掃描時間和高儀器成本可被特定研究收益抵消。
4、天然產(chǎn)物或脂質(zhì)同分異構(gòu)體解析
核心需求:識別結(jié)構(gòu)相近、化學(xué)性質(zhì)相似的異構(gòu)體。
推薦平臺:FT?ICR+ 高效LC分離系統(tǒng)
原因解析:
* 超高分辨率支持結(jié)構(gòu)推測、同位素模式識別。
適配 MS^n 多級碎片定性分析,提升結(jié)構(gòu)解析可靠性。
5、轉(zhuǎn)化研究/生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)
核心需求:樣本量中等,需敏感定量、特異性識別、可擴展驗證。
推薦平臺:Orbitrap,結(jié)合靈敏PRM工作流程
策略建議:
* 初期進行 Discovery,采用Orbitrap進行全面定性。
驗證階段可使用 Targeted (PRM) 提高定量精度。
成熟后可考慮將個別標(biāo)志物的檢測轉(zhuǎn)入質(zhì)譜平臺(單點)或其他方法。
6、預(yù)算與運行成本考量
預(yù)算有限:shǒuxuǎn Orbitrap,xìngjiàbǐgāo,維護省人力;
預(yù)算寬裕、設(shè)施扎實:可選 FT?ICR,適用于特定高難度研究;
實驗室環(huán)境:FT?ICR需要良好磁屏蔽和隔離環(huán)境,部署前需評估成本。
總結(jié)對比與選擇建議
選擇哪種質(zhì)譜平臺,不應(yīng)基于對gāoduān技術(shù)的“盲目追新",而應(yīng)以“研究目的、樣品復(fù)雜度、預(yù)算與實驗室能力"為依據(jù)。Orbitrap在實際dànbáizhì組、PTM定量與轉(zhuǎn)化研究中表現(xiàn)zhuóyuè;而FT?ICR則在同位素解析與結(jié)構(gòu)層面顯示wúkětìdài的精度與可靠性。如果您正處于研究規(guī)劃階段,或已有具體項目需求,歡迎聯(lián)系我們百泰派克生物科技團隊。我們可提供從實驗設(shè)計、樣品方案到平臺選擇與數(shù)據(jù)解讀的全流程支持,助力您獲得更高質(zhì)量、更具影響力的科研成果。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),對蛋白序列進行分析。
※服務(wù)優(yōu)勢:
1.采用目前世界上先進的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。
※服務(wù)優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;
2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;
3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復(fù)度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標(biāo)記物(通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體)標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。
※服務(wù)優(yōu)勢:
1.技術(shù)先進,填補技術(shù)空白
采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細(xì)胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。
3.應(yīng)用前景大
①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標(biāo)。
百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。
1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù);
2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);
3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;
4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務(wù)需求;
5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!
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