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當前位置:北京百泰派克生物科技有限公司>>檢測技術(shù)服務>>蛋白分析>> Co-IP測定檢測技術(shù)服務
產(chǎn)品型號
品 牌百泰派克
廠商性質(zhì)其他
所 在 地北京市
更新時間:2025-07-12 10:04:12瀏覽次數(shù):53次
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Co-IP測定是研究dànbáizhì相互作用的經(jīng)典技術(shù),它廣泛應用于基礎(chǔ)生物學研究、藥物開發(fā)、疾病機制分析等多個領(lǐng)域。這一技術(shù)能夠幫助研究人員揭示dànbáizhì在細胞內(nèi)的功能、信號通路的調(diào)控以及其在疾病發(fā)生中的作用。Co-IP測定的基本原理是通過利用抗體與目標蛋白特異性結(jié)合,捕獲目標蛋白及其與之相互作用的dànbáizhì復合物。該方法結(jié)合了免疫學和dànbáizhì組學的優(yōu)勢,通過免疫沉淀將目標蛋白和與之相互作用的伙伴蛋白從細胞裂解液中分離出來;接下來通過分析這些復合物中的dànbáizhì成分,研究人員能夠識別和確認dànbáizhì的相互作用關(guān)系。在Co-IP測定中,通常需要使用特異性抗體來捕獲目標蛋白,這些抗體可能是針對目標蛋白的單克隆抗體、抗原特異性的多克隆抗體或者是針對目標蛋白標簽的抗體。捕獲后的dànbáizhì復合物通過親和柱或磁珠等技術(shù)沉淀出來;然后通過多種分析方法(如Western blot、質(zhì)譜分析等),研究人員可以進一步鑒定與目標蛋白發(fā)生相互作用的其他dànbáizhì。由于許多重要的生物學過程都依賴于dànbáizhì間的相互作用,這項技術(shù)在生命科學研究中占據(jù)著bùkětìdài的地位。
一、Co-IP測定的關(guān)鍵步驟
Co-IP測定的實施步驟可以分為以下幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié):
1、樣品準備和細胞裂解
樣品的質(zhì)量直接影響到Co-IP測定的結(jié)果,因此首先需要確保使用的細胞或組織樣本的質(zhì)量。在裂解細胞時,要確保使用適當?shù)牧呀饩彌_液,既能有效提取dànbáizhì又能避免dànbáizhì在裂解過程中降解。
2、免疫沉淀
將提取的dànbáizhì與特異性抗體孵育,抗體與目標蛋白結(jié)合后,形成抗原-抗體復合物。接下來,通過親和磁珠、蛋白A/G瓊脂糖等載體將抗原-抗體復合物沉淀下來,從而富集目標蛋白及其互作蛋白。
3、洗滌和分離
沉淀后,通過反復洗滌去除非特異性結(jié)合的dànbáizhì,確保得到的復合物是純凈的,洗滌條件的優(yōu)化對減少背景干擾至關(guān)重要。
4、dànbáizhì鑒定與分析
zuì后,通過SDS-PAGE凝膠電泳和Western blot等方法分離沉淀中的dànbáizhì,或者直接進行質(zhì)譜分析(MS)來鑒定與目標蛋白相互作用的dànbáizhì。Western blot可以通過抗體驗證相互作用蛋白的存在,而質(zhì)譜分析則能提供更加全面的dànbáizhì鑒定信息。
二、Co-IP測定的分析方法
在Co-IP測定中,dànbáizhì復合物的分析通常有以下幾種常用方法:
1、Western blot
Western blot是zuì常用的分析方法,通過抗體識別和標記目標蛋白,可以驗證與目標蛋白相互作用的其他dànbáizhì。通過在凝膠中分離dànbáizhì,結(jié)合膜轉(zhuǎn)移和抗體檢測,Western blot能夠清晰地展示dànbáizhì的大小和豐度。
2、質(zhì)譜分析(Mass Spectrometry, MS)
質(zhì)譜分析可以提供更加全面的dànbáizhì鑒定和定量信息。通過質(zhì)譜儀對dànbáizhì進行離子化、碎片化并分析其質(zhì)譜圖,可以jīngquè地確定dànbáizhì的氨基酸序列并識別和定量與目標蛋白相互作用的dànbáizhì。質(zhì)譜分析在高通量Co-IP測定實驗中尤為重要,能夠揭示更復雜的dànbáizhì互作網(wǎng)絡。
3、dànbáizhì芯片和免疫沉淀實驗結(jié)合
dànbáizhì芯片技術(shù)能夠提供更高通量的dànbáizhì互作分析,結(jié)合Co-IP測定技術(shù),可以在更大范圍內(nèi)篩查dànbáizhì間的相互作用。
三、Co-IP測定的技術(shù)應用
Co-IP測定在多個領(lǐng)域具有重要應用,尤其在揭示dànbáizhì相互作用網(wǎng)絡、疾病研究和藥物篩選中發(fā)揮著重要作用。
1、基礎(chǔ)生物學研究
Co-IP測定是研究dànbáizhì-dànbáizhì相互作用的金標準之一。通過構(gòu)建細胞內(nèi)dànbáizhì的相互作用圖譜,研究人員可以深入理解細胞內(nèi)各種信號通路的運作機制,例如研究轉(zhuǎn)錄因子如何通過與其他dànbáizhì的結(jié)合,調(diào)控基因表達。
2、癌癥研究
在癌癥研究中,Co-IP測定被廣泛應用于發(fā)現(xiàn)癌癥相關(guān)dànbáizhì及其相互作用伙伴。癌癥細胞中常常存在異常的dànbáizhì相互作用,這些異常的互動可能導致細胞的增殖、遷移和轉(zhuǎn)移。通過Co-IP測定可以鑒定出這些異常的dànbáizhì相互作用,從而為癌癥的早期診斷和治療提供靶點。
3、藥物開發(fā)
Co-IP技術(shù)對于新藥篩選有著重要作用,通過研究藥物分子與特定dànbáizhì的相互作用可以揭示其潛在的生物學效應,此外Co-IP技術(shù)還能夠幫助鑒定藥物靶點和評估藥物的特異性和副作用。
4、免疫學研究
Co-IP技術(shù)常用于研究免疫信號通路和免疫應答中的dànbáizhì相互作用,例如,研究T細胞受體與其共刺激分子的相互作用或者腫瘤免疫逃逸過程中免疫抑制分子間的相互作用。
百泰派克生物科技在dànbáizhì組學研究領(lǐng)域擁有豐富的經(jīng)驗和技術(shù)積累,致力于為客戶提供zhuānyè的Co-IP測定服務。我們提供從實驗設計、樣品準備、免疫沉淀到數(shù)據(jù)分析的全流程服務,確保每一項實驗都能高效且準確地完成。我們配備了優(yōu)良的質(zhì)譜分析設備和高效的dànbáizhì分析平臺,能夠幫助客戶深入挖掘dànbáizhì互作網(wǎng)絡和信號傳導機制,推動科研進展。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優(yōu)勢:
1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;
2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。
※服務優(yōu)勢:
1.技術(shù)優(yōu)良,填補技術(shù)空白
采用金屬標記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。
1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務;
3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;
4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!
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