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當前位置:北京百泰派克生物科技有限公司>>檢測技術(shù)服務(wù)>>蛋白分析>> 抗體表征測定檢測技術(shù)服務(wù)
產(chǎn)品型號
品 牌百泰派克
廠商性質(zhì)其他
所 在 地北京市
更新時間:2025-07-07 10:34:00瀏覽次數(shù):50次
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抗體表征測定主要涉及對抗體的結(jié)構(gòu)、功能及其他特性的分析和鑒定??贵w是機體免疫系統(tǒng)的組成部分,能夠識別并中和外來病原體,如病毒和細菌??贵w表征測定的作用在于幫助研究人員和臨床醫(yī)生全面了解抗體的各種特性,包括其結(jié)合特異性、親和力、穩(wěn)定性、純度等。這些特性直接影響抗體的功能和療效。在研發(fā)新型抗體藥物或疫苗時,抗體表征測定可以用于驗證抗體的結(jié)合特異性和親和力,確保其能夠有效靶向疾病相關(guān)抗原。此外,在質(zhì)量控制過程中,抗體表征測定還可以幫助檢測抗體樣品中的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物,保障產(chǎn)品的高純度和穩(wěn)定性。因此,了解和掌握抗體的特性可確保其在臨床應(yīng)用中的安全性和有效性??贵w表征測定是全面評估抗體性質(zhì)的關(guān)鍵流程,能夠確保抗體質(zhì)量、理解其功能及開展后續(xù)應(yīng)用(如生物醫(yī)藥研發(fā)),涵蓋多個維度的分析,具體如下:
1、純度分析
(1)SDS-PAGE 電泳:十二烷基硫酸鈉 - 聚丙烯酰胺凝膠電泳利用 SDS 使dànbáizhì變性,帶上大量負電荷,依據(jù)分子量大小在凝膠中電泳分離。還原條件下,抗體的重鏈、輕鏈會分開,借此觀察有無雜蛋白帶,判斷純度;非還原條件能保留抗體天然結(jié)構(gòu),用于檢測聚合體等大分子雜質(zhì)。
(2)CE-SDS:毛細管電泳結(jié)合 SDS,讓抗體形成 SDS - 蛋白復(fù)合物,在毛細管內(nèi)按分子量快速分離。具有分辨率高、分析速度快、樣本量需求少的優(yōu)勢,可jīngzhǔn識別不同分子量雜質(zhì),測定純度。
(3)SEC-HPLC:尺寸排阻高效液相色譜基于分子大小進行分離,大分子先流出,小分子后流出。能檢測抗體聚集體、片段等雜質(zhì),同時給出不同分子量組分相對含量,直觀呈現(xiàn)純度情況。
2、完整性與分子量測定
(1)MALDI-TOF MS:基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜,將抗體與基質(zhì)混合,經(jīng)激光脈沖離子化,離子依質(zhì)荷比在飛行管飛行,依飛行時間測定分子量。測量范圍廣、精度高,還可分析抗體糖基化修飾后的分子量變化。
(2)ESI-MS:電噴霧電離質(zhì)譜,溶液中抗體在高電場下形成帶電液滴,經(jīng)去溶劑化形成氣態(tài)離子,測其質(zhì)荷比推知分子量 ,適合分析大分子量且易帶電荷的抗體。
3、 電荷異構(gòu)體分析
(1)等電聚焦電泳(IEF):依據(jù)dànbáizhì等電點差異在 pH 梯度膠內(nèi)聚焦分離。不同電荷異構(gòu)體等電點有別,聚焦在凝膠不同位置,經(jīng)染色顯現(xiàn),據(jù)此了解電荷分布,判斷異構(gòu)體比例。
(2)離子交換色譜(IEX):利用抗體與離子交換劑表面離子基團的靜電相互作用,依電荷差異洗脫分離,搭配紫外或熒光檢測器,定量分析各電荷異構(gòu)體。
4、親和力測定
(1)表面等離子共振(SPR):將抗體固定于傳感器芯片,注入抗原溶液,抗原與抗體結(jié)合引發(fā)芯片表面折射率變化,實時監(jiān)測結(jié)合與解離過程,根據(jù)傳感圖計算親和力常數(shù),jīngzhǔn反映二者結(jié)合強度。
(2)生物膜層干涉技術(shù)(BLI):光纖生物傳感器jiānduān固定抗體,浸入抗原溶液,二者結(jié)合使生物膜厚度改變,干涉光譜隨之變化,由此測定親和力,操作簡便、通量較高。
5、抗原結(jié)合特異性分析
(1)ELISA:酶聯(lián)免疫吸附測定,將抗原包被于微孔板,加入待檢抗體與酶標二抗,經(jīng)顯色反應(yīng),依吸光度判斷抗體與抗原特異性結(jié)合情況,靈敏度高、適合高通量篩選。
(2)Western blot:dànbáizhì經(jīng)電泳轉(zhuǎn)移至膜上,用抗體孵育,若特異性結(jié)合,再用標記二抗顯色,驗證抗體與靶抗原識別能力。
6、抗體活性測定
(1)細胞水平功能實驗:例如抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性(ADCC)實驗,檢測抗體招募免疫細胞殺傷靶細胞的能力;補體依賴性細胞毒性(CDC)實驗,看抗體激活補體系統(tǒng)裂解靶細胞的效率,真實反映體內(nèi)生物學功能。
(2)中和實驗:針對有中和活性的抗體,將抗體與病毒、毒素等致病因子共孵育,再作用于敏感細胞或動物模型,觀察致病效果是否被抑制,測定其中和能力。
7、糖基化分析
(1)HPLC:高效液相色譜搭配不同檢測器,分離鑒定糖鏈結(jié)構(gòu)、測定糖基化程度,依保留時間、峰面積量化分析。
(2)質(zhì)譜:無論 MALDI - TOF 還是 ESI - MS,都能解析糖鏈組成、連接方式及修飾位點,是深度剖析糖基化的有力工具。
常見方法
1、質(zhì)譜分析:通過質(zhì)譜分析,可以準確鑒定抗體的氨基酸序列和翻譯后修飾,從而幫助研究人員了解抗體的結(jié)構(gòu)和功能。
2、等電聚焦:等電聚焦用于測定抗體的等電點(pI),是鑒定抗體純度和異質(zhì)性的手段。通過分離不同pI的抗體分子,等電聚焦能夠識別抗體樣品中的微小變異。
3、動態(tài)光散射:動態(tài)光散射用于評估抗體分子的粒徑分布和聚集狀態(tài)。該方法能夠快速提供有關(guān)抗體穩(wěn)定性的信息,有助于優(yōu)化抗體的制備及儲存條件。
4、表面等離子體共振:此技術(shù)用于測量抗體與抗原之間的相互作用,包括結(jié)合親和力和動力學參數(shù)。通過實時分析抗體與抗原的相互作用,表面等離子體共振能夠為抗體的功能性研究提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。
在dànbáizhì組學領(lǐng)域,百泰派克生物科技憑借其豐富的經(jīng)驗和*的技術(shù),提供全面的抗體表征測定服務(wù)。我們的團隊致力于為客戶提供高質(zhì)量的分析結(jié)果,確保抗體在研發(fā)和應(yīng)用中的高效性和安全性。憑借zhuānyè的技術(shù)支持和個性化的服務(wù),我們期待成為您在抗體研究與開發(fā)中的可靠合作伙伴。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),對蛋白序列進行分析。
※服務(wù)優(yōu)勢:
1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務(wù),助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務(wù)優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;
2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復(fù)度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。
※服務(wù)優(yōu)勢:
1.技術(shù)*,*技術(shù)空白
采用金屬標記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應(yīng)用前景大
①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。
1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù);
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);
3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等;
4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務(wù)需求;
5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!
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