蛋白質(zhì)免疫印跡和電轉(zhuǎn)移服務(wù)檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

電泳分離的蛋白質(zhì)從凝膠基質(zhì)轉(zhuǎn)移或“印跡"到膜（通常是硝酸纖維素或PVDF）上，然后在膜表面進(jìn)行基于抗體的后續(xù)檢測，稱為蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot或immunoblotting）。百泰派克生物科技提供蛋白質(zhì)免疫印跡分析服務(wù)，蛋白質(zhì)免疫印跡法通過高選擇性和高敏感的抗體-抗原相互作用，可用于從復(fù)雜蛋白質(zhì)混合物中檢測特定的目標(biāo)蛋白質(zhì)，例如組織勻漿或細(xì)胞提取物等。所得數(shù)據(jù)可用于對目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行定性和半定量分析。

蛋白免疫印跡是一種廣泛使用的蛋白質(zhì)分析技術(shù)，可用于檢測組織勻漿或提取物樣品中的特定蛋白質(zhì)。蛋白免疫印跡法使用凝膠電泳法分別通過3-D結(jié)構(gòu)和多肽鏈的長度對天然蛋白質(zhì)及變性蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，分離后的蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)移到膜（通常是硝酸纖維素膜或PVDF）上，zuì后在膜上用對目標(biāo)蛋白質(zhì)具有特異性的抗體進(jìn)行特異性識別。Western Blot廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫遺傳學(xué)和其他分子生物學(xué)領(lǐng)域。 在蛋白免疫印跡分析中，首先利用各種方法，如和IEF，通過等電點(diǎn)（pI）、分子量、電荷或這些因素的組合，從凝膠電泳中分離出樣品中的蛋白質(zhì)。常用SDS-PAGE進(jìn)行分離，因為所有蛋白質(zhì)都被溶解在凝膠內(nèi)，沿相同方向遷移，結(jié)合SDS的變性作用，抗原表位更容易被識別。 凝膠電泳分析之后，將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移至由硝酸纖維素或聚偏二氟乙烯（PVDF）制成的膜上，以用于抗體檢測。PVDF膜與蛋白質(zhì)的結(jié)合能力比硝酸纖維素膜更高，但硝酸纖維素膜與較小蛋白質(zhì)結(jié)合的更好。轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì)的主要方法是電印跡，電印跡法使用電流將蛋白質(zhì)從凝膠中拉入PVDF或硝酸纖維素膜中。電泳轉(zhuǎn)移方法包括：濕法轉(zhuǎn)印、半干轉(zhuǎn)印和半濕轉(zhuǎn)印。如果使用等電點(diǎn)聚焦進(jìn)行蛋白質(zhì)分離，那么利用壓力轉(zhuǎn)印擴(kuò)散來轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì)更為有效。 轉(zhuǎn)印過程從一個小時（半干轉(zhuǎn)?。┑竭^夜轉(zhuǎn)印（濕法轉(zhuǎn)?。瑫r間不等。轉(zhuǎn)印完成后，膜的自由結(jié)合位點(diǎn)被蛋白質(zhì)混合物封閉，因此后續(xù)抗體檢測不會受到干擾。即可對轉(zhuǎn)印到膜上的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗體檢測。包含蛋白質(zhì)的膜首先與一抗進(jìn)行孵育，然后再由識別一抗的二抗結(jié)合后進(jìn)行檢測。二抗一般帶有報告基團(tuán)，并具有很高的靈敏度。 zuì靈敏的檢測方法是使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（ECL）：通過抗體-辣根結(jié)合物對一抗進(jìn)行識別。使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光的特殊變體，可檢測低至1 pg的蛋白條帶。 蛋白免疫印跡還可用于追蹤，與磷酸化蛋白質(zhì)的所有亞型相結(jié)合的抗體會在二維凝膠上呈現(xiàn)“念珠狀"外觀。也可用于鑒定免疫共沉淀產(chǎn)生的復(fù)合物中的已知蛋白和未知蛋白，只要目標(biāo)蛋白質(zhì)在凝膠中，就可以通過考馬斯亮藍(lán)染色，從凝膠中切出相應(yīng)的斑點(diǎn)，進(jìn)行后續(xù)質(zhì)譜鑒定。

SDS-PAGE

蛋白質(zhì)的磷酸化

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測序法的蛋白質(zhì)從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質(zhì)組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白質(zhì)組學(xué)、靶向蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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