TMT/iTRAQ/MultiNotch定量蛋白組學分析檢測技術(shù)服務詳情介紹

iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和(Tandem Mass Tags)技術(shù)是分別由美國AB Sciex公司和Thermo Fisher公司研發(fā)的多肽體外標記定量技術(shù)。這兩種技術(shù)采用多個（2-10）穩(wěn)定同位素標簽，特異性標記多肽的氨基基團進行串聯(lián)質(zhì)譜分析，能夠同時比較多達10種不同樣本中蛋白質(zhì)的相對含量，可用于研究不同病理條件下或者不同發(fā)育階段的組織樣品中蛋白質(zhì)表達水平的差異。 對于可以傳代的細胞樣品來說，我們可以采取的方法完成對于細胞蛋白質(zhì)組的標記過程，但是許多其他研究體系，比如組織樣品以及不能進行傳代培養(yǎng)的細胞來說，需要其他的標記方法來完成定量蛋白組學分析。TMT, iTRAQ等基于體外（in vitro）標記的定量方法應運而生。 iTRAQ標簽包括三部分，如下圖： 1. 報告基團（reporter group）：指示蛋白樣品豐度水平。 2. 平衡基團（balance group）：平衡報告基團的質(zhì)量差，使等重標簽重量一致，保證標記的同一肽段m/z相同。 3. 肽反應基團（amine-specific reactive group)：能與肽段N端及賴氨酸側(cè)鏈氨基發(fā)生共價連接，從而標記上肽段。TMT

SILAC

iTRAQ和TMT標簽結(jié)構(gòu)圖

來自不同樣品的同一肽段經(jīng)TMT/iTRAQ試劑標記后具有相同的質(zhì)量數(shù)，并在一級質(zhì)譜檢測（MS1）中表現(xiàn)為同一個質(zhì)譜峰。當此質(zhì)譜峰被選定進行碎裂后，在二級質(zhì)譜檢測（MS2）中，不同的報告基團被釋放，它們各自的質(zhì)譜峰的信號強弱，代表著來源于不同樣品的該肽段及其所對應的蛋白的表達量的高低。TMT/iTRAQ定量蛋白組學研究因其測定jīngzhǔn度高適應樣品種類多，目前已有很廣泛的應用。百泰派克在傳統(tǒng)的TMT/iTRAQ分析技術(shù)的基礎上，提供TMT/iTRAQ/MultiNotch MS分析技術(shù)，使用三級碎片報告離子進行定量，可進一步提高TMT/iTRAQ定量蛋白組學分析的精度，進一步提高定量準確性。 百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusio Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，推出基于TMT/iTRAQ/MultiNotch MS的定量蛋白組分析服務技術(shù)包裹，您只需要將您的實驗目的告訴我們并將您的蛋白寄給我們，我們會負責項目后續(xù)所有事宜，包括蛋白酶切、肽段標價、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學分析。

iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析實驗流程

iTRAQ 8-plex定量蛋白組學分析流程

iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析技術(shù)特點

• 高通量定量蛋白分析：可以同時分析10個樣品；適合大量臨床樣本，多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物 • 體外標記，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品 • 質(zhì)譜分析靈敏度高，可檢測較低豐度蛋白，大范圍比較蛋白相對豐度 • 可與富集磷酸化等修飾肽段的方法聯(lián)用，更準確研究翻譯后修飾變化

iTRAQ/TMT定量蛋白組學分析樣品要求

TMT-iTRAQ-MultiNotch定量蛋白組學分析樣品要求

注意：樣品運輸請使用足量的干冰運輸，并且盡量選用較快的郵遞方式，以降低運輸過程中樣品降解的可能性。

中/英文項目報告

在技術(shù)報告中，百泰派克生物科技會為您提供詳細的中英文雙語版技術(shù)報告，報告包括： 1. 實驗步驟（中英文） 2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文） 3. 質(zhì)譜圖片 4. 原始數(shù)據(jù) 5. 蛋白差異水平分析 6. 生物信息學分析

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質(zhì)序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測序法的蛋白質(zhì)從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質(zhì)組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白質(zhì)組學、靶向蛋白質(zhì)組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質(zhì)組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!

TMT/iTRAQ/MultiNotch定量蛋白組學分析檢測技術(shù)服務詳情介紹