【肿瘤坏死因子α（TNF-α）简介】：由中性粒细胞、活化的淋巴细胞、巨噬细胞、NK细胞、LAK细胞、星形胶质细胞内皮细胞、平滑肌细胞和一些转化细胞产生。自然发生的TNF-α形式是糖基化的，但非糖基化的重组TNF-α具有相当的生物活性。据报道，TNF-α的生物活性原生形式是一个三聚体。

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

实验材料与试剂配制：

1.  仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

样品收集、处理及保存：鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒

【细胞培养上清】：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【血清】：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

【血浆】：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【体液】：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【样本要求】：样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

【样本保存】：如果样品不能立即检测，应将其分装，-80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒性能：

【准确性】：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

【检测范围】：请咨询我司销售人员领取说明书

【灵敏度】：zui低检测浓度小于1.0pg/ML

【特异性】：不与其它可溶性结构类似物交叉反应

【重复性】：板内、板间变异系数均小于15%

洗板方法：

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

技术小提示：

1.      当混合或重溶蛋白溶液时，尽量避免起沫。

2.      为了避免交叉感染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。

3.      每次孵育时，请正确使用封板胶可保证结果的准确性。

4.      混合后的显色底物在上板前应为无色，请避光保存；假如微孔板后，将由物色变成不同深度的蓝色。

5.      终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致；加入终止液后，孔内颜色由蓝变黄；若孔内有绿色，则表明孔内液体未混匀；请充分混合。

上海轩泽康生物ELISA试剂盒种类繁多，根据产品名称原理大致分为间接法、夹心法、竞争法、捕获包被法（也称为反向间接法，比较少见）。其中各类型试剂盒的基本原理可电询我司业务人员进行详细了解。以下是关于各类型ELISA试剂盒及适用类型：

①间接法：测定总抗体或IgG抗体

②抗体夹心法：测定二价或二价以上大分子抗原

③抗原夹心法：测定抗体

④抗体竞争法：测定抗体

⑤抗原竞争法：测定只有一个抗原决定簇的小分子半抗原

⑥捕获包被法：测定IgM,传染病的早期诊断