检测原理：试剂盒采用一步间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被免疫缺陷病毒抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中抗免疫缺陷病毒抗体（HIV Ab）的存在与否。

上海轩泽康生物96T试剂盒人免疫缺陷病毒抗体(HIV-Ab)ELISA试剂盒组成及其配置：

①微孔酶标板（ 12 孔×8 条）；

②阴性对照 0.5mL；

③阳性对照 0.5mL；

④检测抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗涤缓冲液 25mL；

⑥稀释液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨终止液 6mL；

⑩封板膜 2 张；说明书 1 份；自封袋 1 个.

备注：20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

实验所需自备试验器材：

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

人免疫缺陷病毒抗体(HIV-Ab)ELISA试剂盒常见问题解答：

1.   问：如何选择合适的阳性对照？

上海轩泽物解答：阳性对照的基本组成应该尽量与检测样本的组成一致，一般阳性对照多以含蛋白?；ぜ恋幕撼逡何剩尤胍欢康拇煳镏?。比如：以人血清为标本的测定，阳性对照多用确定的病人血清或者以覆盖人血浆为原料加入一定量标准品。

2. 问：我能否在实验开始前*收集样品？

上海轩泽物解答：可以。如若收集的样本不能及时进行检测，请保存至-20℃或按照说明书进行保存。应避免反复冻融。

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