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全式金Trans5α化學感受態細胞(CD201-02)現貨供應

閱讀:1876      發布時間:2024-3-21
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全式金Trans5α化學感受態細胞(CD201-02)是經過特殊工藝制作的細胞,適用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒DNA進行測試時,轉化效率可高達每微克DNA超過108個轉化單位(cfu)。該菌株的基因型為F-φ80d lacZ△M15△(lacZYA-argF)U169 end Al recA1 hsdR17(rk-,mk+)supE44λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA。

全式金Trans5α化學感受態細胞(CD201-02)也適用于藍白斑篩選,其突變基因recA?和endA?有助于克隆DNA的穩定性和高純度質粒DNA的提取。這種細胞可以在-70℃保存六個月,但不適合在液氮中保存。請注意遵循適當的存儲條件以確保細胞的長期保存和使用質量。

操作方法:

·取50 ml冰浴上融化的感受態細胞,加入目的DNA,輕輕混勻,在冰浴中放置30分鐘。

·42℃水浴熱激45秒,然后快速將管轉移到冰浴中2分鐘,該過程不要搖動離心管。

·向每個離心管中加入500μ無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃,200rpm培養1小時使細菌復蘇。

·根據實驗要求(質粒,重組連接產物轉化),吸取不同體積已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的LB瓊脂培養基上,將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平板,37℃過夜培養。

注意事項:

· 避免反復凍融:盡量避免頻繁地凍融細胞。每次解凍后,盡可能立即進行轉化實驗,而不是將其再次冷凍。

· 避免使用移液槍吹吸:在操作過程中,盡量避免使用移液槍進行強力吸取和排放細胞。這樣可以減少對細胞的機械壓力和損傷。

· 輕柔操作:在整個操作過程中要注意輕柔處理細胞。避免過度搖動或震蕩細胞,以防止細胞破裂或損壞。

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CD201-02

Trans5α Chemically Competent Cell

20×100 μl



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