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溶菌酶的紫外分光光度法檢測

閱讀:1582        發(fā)布時間:2017-12-19

   溶菌酶又稱胞壁質(zhì)酶,是一種堿性蛋白質(zhì),它在自然界中廣泛存在于哺乳動物乳汁、體液,禽類的蛋白、微生物體內(nèi)及木瓜、卷心菜、大麥等植物中。其中以蛋清中的溶菌酶的含量zui為豐富,可達0.3%。溶菌酶具有溶菌、殺菌、抗病毒、抗腫瘤細(xì)胞的作用,而且對人體無任何毒副作用。因此它在食品工業(yè)、醫(yī)療、生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,溶菌酶含量的檢測就具有了現(xiàn)實意義。

   傳統(tǒng)的對溶菌酶的定量分析方法是顯色法。即根據(jù)溶菌酶通過水解細(xì)菌細(xì)胞壁中的粘多糖而使之裂解這一特性,將待測樣品和一定量的染色小球菌在適宜的條件下反應(yīng),染色小球菌被樣品中的溶菌酶溶解,而釋放出顏色,其顏色的深淺與溶菌酶的含量呈正比,再利用可見分光光度計繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定溶菌酶的含量。傳統(tǒng)方法存在一定的缺點,其一是因為要用染色小球菌,這種小球菌造價比較昂貴;其二此方法的操作比較麻煩,要求在無菌的條件下進行操作,這對工業(yè)生產(chǎn)來說即不經(jīng)濟又不方便。本文嘗試用紫外分光光度法對溶菌酶的含量進行分析檢測。

儀器準(zhǔn)備

UV1700系列 紫外可見分光光度計

UV1700PC UV Visible Spectrophotometer

簡介 : 本產(chǎn)品采用全新設(shè)計的比例監(jiān)測雙光束學(xué)系統(tǒng),具有優(yōu)良的光學(xué)性能,使用方便,是實驗室分析*的基本儀器之一。

應(yīng)用領(lǐng)域: 各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器,應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水、飲用水、加工過程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補給水等。

 

試劑準(zhǔn)備

溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品(優(yōu)級純)、氯化鈉(分析純)、雞蛋(市售,新鮮)、二次蒸餾水。

氯化鈉溶液:分析純的氯化鈉溶解于二次蒸餾水中配制成0.85%(W/v)的溶液。

 

譜圖分析

測定結(jié)果:

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