為確保產(chǎn)品安全性而實(shí)施的微生物檢查或遺傳毒性試驗(yàn)。在微生物檢查中，對培養(yǎng)基上活菌菌落數(shù)量的經(jīng)時(shí)變化進(jìn)行計(jì)數(shù)，以計(jì)算菌數(shù)量的形式并進(jìn)行微生物評價(jià)。另外，在作為一種遺傳毒性試驗(yàn)的Ames試驗(yàn)（艾姆斯試驗(yàn)）中，向原本無法自己產(chǎn)生氨基酸的菌株投入試驗(yàn)物質(zhì)，根據(jù)其中形成的菌落及其比重來評價(jià)誘發(fā)突變性。
在此類實(shí)驗(yàn)中，需要對隨著時(shí)間變化而在培養(yǎng)板上增殖，變化的活細(xì)胞或菌落進(jìn)行區(qū)分測量，如果憑借測量人員的目視測量計(jì)數(shù)，容易產(chǎn)生數(shù)值的偏差或人為誤差，影響對該培養(yǎng)板的準(zhǔn)確評價(jià)。以高倍率觀察培養(yǎng)板或計(jì)數(shù)并評價(jià)形成的菌落時(shí)，由于視野變窄無法快速觀察培養(yǎng)板整體的情況，需要花費(fèi)大量時(shí)間逐一視野查看計(jì)數(shù)。而且還有很大的風(fēng)險(xiǎn)漏看錯(cuò)看。
另外，在再生醫(yī)療研究領(lǐng)域，觀察培養(yǎng)板整體并準(zhǔn)確分析iPS細(xì)胞菌落數(shù)量是評價(jià)該實(shí)驗(yàn)的重要方法。并且，在以改善培養(yǎng)工序以及提高培養(yǎng)效率為目的的實(shí)驗(yàn)中，需要大量進(jìn)行針對不同條件、培養(yǎng)基種類以及傳代方法等對比試驗(yàn)。
但是，在菌落計(jì)數(shù)或測量中，因各工作人員手動計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)以及方法不同造成的結(jié)果的偏差和人為誤差，會影響統(tǒng)計(jì)結(jié)果的準(zhǔn)確性。尤其是iPS細(xì)胞在培養(yǎng)過程中形成菌落的同時(shí)細(xì)胞也在自我增殖，菌落內(nèi)的細(xì)胞形態(tài)會發(fā)生變化。因此，細(xì)胞間的界限可能難以判斷，更增大了目視計(jì)數(shù)的難度進(jìn)而影響評價(jià)的準(zhǔn)確性。
在發(fā)生手動計(jì)數(shù)錯(cuò)誤或自動計(jì)數(shù)時(shí)發(fā)生誤檢時(shí)，需要花費(fèi)大量時(shí)間和經(jīng)費(fèi)重新開啟實(shí)驗(yàn)。在各種檢查或測試、實(shí)驗(yàn)等中，在人數(shù)有限的情況下消除勞力與時(shí)間上的浪費(fèi)，并取得更多成果，必須同時(shí)提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性與工作效率。
基恩士的一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800，僅需1臺即可以多功能支持熒光、相位差、明視場觀察及各種拍攝方法。還可實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)板的整體觀察、定量菌落計(jì)數(shù)及面積測量等，解決實(shí)驗(yàn)、研究或試驗(yàn)、檢查中的諸多課題。
結(jié)合使用電動載物臺的全自動圖像拼接模塊來觀察培養(yǎng)板整體，以及對iPS細(xì)胞培養(yǎng)板的整體圖像進(jìn)行菌落分析的案例，介紹導(dǎo)入BZ-X800的優(yōu)點(diǎn)。
使用顯微鏡在高倍率下觀察菌落時(shí)，由于視野變窄，必須一邊保存載物臺坐標(biāo)逐一移動視野觀察局部圖像。因此，無法將培養(yǎng)板整體納入一個(gè)視野內(nèi)的同時(shí)以高倍率觀察微小菌落。也可將高倍率拍攝的圖像經(jīng)過圖像處理拼接成1張圖像，以獲得大視野圖像，但通過手動操作進(jìn)行拼接作業(yè)不僅難度高，還需花費(fèi)大量時(shí)間。綜上所述，如何在經(jīng)時(shí)變化的活細(xì)胞或活菌不產(chǎn)生影響的情況下，快速觀察培養(yǎng)板整體尤為重要。
BZ-X800搭載大型電動載物臺，可按照程序在X、Y、Z軸方向上自動移動的同時(shí)，在高倍率下連續(xù)拍攝圖像，并自動進(jìn)行圖像拼接，可輕松獲取培養(yǎng)板整體的高分辨率圖像。即可觀察培養(yǎng)板整體的大視野圖像，也可觀察高倍率下菌落的形態(tài)，在不遺漏且不會遺失觀察坐標(biāo)的情況下進(jìn)行觀察。
另外，可對多孔培養(yǎng)板中的多個(gè)孔自動執(zhí)行批量圖像拼接。
活細(xì)胞或活菌的經(jīng)時(shí)變化影響到對培養(yǎng)板內(nèi)的分析結(jié)果與評價(jià)，因此重要的是快速獲得定量分析結(jié)果。
以下圖像是對使用BZ-X800的圖像拼接獲得的iPS細(xì)胞培養(yǎng)板單孔圖像，使用“混合細(xì)胞計(jì)數(shù)"自動實(shí)施菌落計(jì)數(shù)及面積測量的案例。通過大視野觀察對培養(yǎng)板整體中菌落的數(shù)量及面積的平均、標(biāo)準(zhǔn)偏差、總數(shù)值進(jìn)行定量測量，可快速獲得分析結(jié)果。由此，得以消除手動計(jì)數(shù)所需的大量時(shí)間與勞力，以及發(fā)生人為誤差的風(fēng)險(xiǎn)。
使用多孔培養(yǎng)板時(shí)，通過使用BZ-X800的“宏細(xì)胞計(jì)數(shù)"，可以以其中1張圖像的分析條件作為模板，在同一條件下批量自動測量其他的多張圖像。
采用人工計(jì)數(shù)對多個(gè)孔的菌落進(jìn)行分析，不僅花費(fèi)大量的時(shí)間與精力，還因不同的測量人員因操作方法不一而發(fā)生分析結(jié)果及評價(jià)上的偏差，BZ-X800則可在短時(shí)間內(nèi)輕松實(shí)現(xiàn)定量測量與評價(jià)。
如果引進(jìn)一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800
使用大型載物臺的“圖像拼接"，能夠高速自動拍攝培養(yǎng)板整體并進(jìn)行拼接。以簡單的操作，實(shí)施培養(yǎng)板整體及微小菌落的高分辨率無縫觀察。
使用多孔培養(yǎng)板時(shí)也可對多個(gè)孔自動執(zhí)行批量圖像拼接，輕松獲取大視野圖像。
“混合細(xì)胞計(jì)數(shù)"可準(zhǔn)確地進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)與面積測量。還可輕松獲取面積的平均、標(biāo)準(zhǔn)偏差、總數(shù)值。
使用“宏細(xì)胞計(jì)數(shù)"，可以1張圖像的同一條件批量測量其他的多張圖像。可在短時(shí)間內(nèi)執(zhí)行多個(gè)孔的定量分析。
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