一、仪器校准与准备

1. 校准仪器：
   • 开启仪器，检查温度、压力、湿度等参数是否正常。
   • 使用标准菌株或校准工具验证菌落计数功能，确保仪器显示精度符合要求。
2. 试剂与样品准备：
   • 准备无菌生理盐水、培养基（如营养琼脂）、无菌棉拭子等。
   • 样品需进行无菌处理，若为液体需控制颗粒杂质（如离心或过滤）。

二、样品处理与加载

1. 无菌操作：
   • 在洁净台或无菌室内操作，避免环境微生物污染。
   • 固体样品用无菌棉拭子擦拭表面，液体样品直接抽滤。
2. 加载样品：
   • 将样品注入滤杯，注意液体高度不超过刻度线。
   • 启动真空泵，使样品通过滤膜，微生物被截留在膜上。

三、滤膜转移与培养

1. 转移滤膜：
   • 用无菌镊子取出滤膜，菌面朝上贴于培养基表面，避免气泡。
   • 封闭培养皿，标记样品信息。
2. 恒温培养：
   • 将培养皿置于恒温培养箱，根据微生物类型设定温度（如37℃）和时间（24-48小时）。
   • 培养期间每日观察菌落生长情况。

四、菌落计数与分析

1. 计数规则：
   • 培养结束后，统计滤膜上的菌落数，按公式换算为样品中的微生物含量。
   • 区分细菌、霉菌、酵母菌，记录形态学特征。
2. 结果分析：
   • 对比标准限值（如药典规定），判断样品是否合格。
   • 异常结果需复检或结合其他方法验证。

五、清洁与维护

1. 仪器清洁：
   • 使用75%酒精擦拭仪器表面，滤杯、硅胶管用蒸馏水冲洗后晾干。
   • 真空泵定期更换机油，保持管路畅通。
2. 耗材管理：
   • 滤膜、密封圈等耗材需干燥保存，避免污染。
   • 定期校准仪器，记录维护日志。

总结：微生物限度仪通过“校准-抽滤-培养-计数-维护”的闭环流程，为药品、食品等领域提供高效的微生物污染检测方案。标准化操作结合严格质控，是保障产品质量与安全的关键环节。