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熒光定量PCR的應(yīng)用

閱讀:1032        發(fā)布時間:2022-12-16
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。  
分子生物學(xué)研究:
1核酸定量分析對傳染性疾病進行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感,轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測,RNAi基因失活率的檢測等。  
2基因表達差異分析比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等),特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證  
3SNP檢測檢測單核苷酸多態(tài)性對于研究個體對不同疾病的易感性或者個體對特定藥物的不同反應(yīng)有著重要的意義,因分子信標結(jié)構(gòu)的巧妙性,一旦SNP的序列信息是已知的,采用這種技術(shù)進行高通量的SNP檢測將會變得簡單而準確。  
4甲基化檢測甲基化同人類的許多疾病有關(guān),特別是癌癥,Laird報道了一種稱作Methylight的技術(shù),在擴增之前先處理DNA,使得未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不受影響,用特異性的引物和Taqman探針來區(qū)分甲基化和非甲基化的DNA,這種方法不僅方便而且靈敏度更高。

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