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毛細(xì)管電泳的故障解決以及使用注意事項(xiàng)
閱讀：3765 發(fā)布時(shí)間：2022-10-14
毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容，它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平，并使單細(xì)胞分析，乃至單分子分析成為可能。雙電層是指兩相之間的分離表面由相對(duì)固定和游離的兩部分離子組成的與表面異號(hào)的離子層，凡是浸沒(méi)在液體中的界面都會(huì)產(chǎn)生雙電層。在毛細(xì)管電泳中，無(wú)論是帶電粒子的表面還是毛細(xì)管管壁的表面都有雙電層。
毛細(xì)管電泳故障解決
1 斷流的可能原因
a、有氣泡。解決辦法：所有進(jìn)入毛細(xì)管的液體都要超聲排氣，特別是容易起氣泡的溶液，如SDS。
b、有沉淀物。解決辦法：所有進(jìn)入毛細(xì)管的液體都要過(guò)濾，濾膜孔徑要比毛細(xì)管內(nèi)徑小。
c、毛細(xì)管有裂口，最容易裂的地方是窗口處和毛細(xì)管出口端，有時(shí)候看不出來(lái)，因?yàn)榧訅鹤⑺臅r(shí)候仍能看到液滴出來(lái)，需要用手碰一碰才能發(fā)現(xiàn)。
2 基線漂移
a、毛細(xì)管沒(méi)活化好：需要用0.1 M氫氧化鈉多沖一沖
b、毛細(xì)管沒(méi)平衡好：沖完氫氧化鈉和水后需要用buffer再?zèng)_一段時(shí)間，這個(gè)時(shí)間得根據(jù)buffer的組成而定。必要時(shí)候需要跑空白一段時(shí)間。
c、燈接近壽命：查看燈的使用時(shí)間，如果已經(jīng)兩千多個(gè)小時(shí)接近三千小時(shí)的話，可以考慮換燈了。
d、毛細(xì)管壽命已到。毛細(xì)管是有使用壽命的，這個(gè)壽命長(zhǎng)短說(shuō)不好，得看你怎么保養(yǎng)，當(dāng)然，還跟使用的buffer有關(guān)。有些buffer特別傷管子的。
3 常見(jiàn)緩沖溶液的使用
緩沖溶液一般是先配好stock solution，使用的時(shí)候再進(jìn)行稀釋。但是stock solution也不能長(zhǎng)時(shí)間存放，0.1 M 的磷酸、硼砂等溶液常溫下一個(gè)星期就會(huì)有變化，再長(zhǎng)時(shí)間可以看到有沉淀析出。但是也不能因此放到冰箱去，因?yàn)榉诺奖湟矔?huì)有沉淀析出，最好常溫存放，然后每星期重配一次。另外，配置硼砂的時(shí)候要稍微加熱幫助溶解，不然溶解不了。但加熱也不要太猛烈，不然溶解效果也是不好。
4 sds使用注意事項(xiàng)
sds在配置過(guò)程中容易產(chǎn)生氣泡，所以如果用容量瓶來(lái)配置是不實(shí)際的。這時(shí)候就不能對(duì)sds的濃度做精確要求。所以，一般用量筒或者離心管配置就好了，加水的時(shí)候用玻棒引流，小心的攪拌，邊配置邊超聲促進(jìn)溶解。
5 毛細(xì)管的使用和維護(hù)
避免用強(qiáng)堿溶液長(zhǎng)時(shí)間沖洗，比如1 M氫氧化鈉，內(nèi)壁會(huì)被腐蝕的。長(zhǎng)時(shí)間不用的時(shí)候應(yīng)該吹干，兩端密封保存。也有人建議用水封存。
6 UV燈的使用注意事項(xiàng)
不要暴力關(guān)電，要在操作界面按關(guān)燈鍵。一般不超過(guò)兩小時(shí)暫停檢測(cè)不需要關(guān)燈，因?yàn)殚_關(guān)燈都是會(huì)對(duì)燈造成損害的。