微生物穿透试验仪是评估医用防护材料(如手术衣、防护服、口罩)阻菌性能的关键设备，其操作规范性直接影响检测结果的准确性与可靠性。以下从试验前准备、操作流程、结果判定、维护要点四方面详述使用细节：?
一、试验前准备?
1. 设备状态确认：开机预热30分钟，检查气路密封性(关闭所有阀门后压力表无下降)、培养皿旋转平台运转平稳度；验证紫外灭菌灯有效性(照射强度≥80μW/cm²)。?
2. 样品制备：按标准要求裁取试样(如YY/T 0569规定直径50mm±5mm)，非织造布需避免层间剥离；阳性对照采用同材质未处理样品，阴性对照为无菌滤膜。?
3. 菌悬液配制：选用金黄色葡萄球菌ATCC 6538作为模式菌株，经37℃培养24小时后用生理盐水稀释至OD值0.5麦氏比浊度(约1×10? CFU/mL)，现配现用。?
二、核心操作流程?
1. 定量加载菌液：将0.5mL菌悬液均匀滴加至试样中心区域，覆盖面积不超过试样表面积的10%；同步设置空白对照(不加菌液的培养基)。?
2. 压力参数设置：根据产品标准选择试验压力(如防护服要求1kPa±0.1kPa)，通过精密调压阀控制气流速度，确保压力波动范围≤±5%。?
3. 动态暴露过程：启动气源使菌液雾化穿透试样，持续作用时间严格遵循标准(通常为5min±10s)，期间保持培养皿匀速旋转(转速设定为6rpm±0.5rpm)。?
4. 收集与培养：暴露结束后立即将试样背面的培养皿更换至新无菌培养皿，转移至37℃恒温培养箱倒置培养48h±2h，观察菌落生长情况。?
三、关键控制要点?
污染防控：操作全程在生物安全柜内完成，佩戴无菌手套；每组试验后更换高效过滤器，防止交叉污染。?
压力稳定性：采用数字式压力传感器实时监测，若压力偏离设定值超过10%，需终止试验并重新装样。?
平行试验要求：每个样品至少进行3次独立重复试验，计算平均穿透率，单次结果与均值偏差超过15%时需增加重复次数。?
四、结果判定与记录?
1. 定性判断：培养后若培养基出现典型菌落(金黄色葡萄球菌呈圆形凸起、表面光滑)，则判定为穿透阳性；无可见菌落为阴性。?
2. 定量分析：对阳性结果进行菌落计数，计算单位面积穿透菌数(CFU/cm²)，并与标准限值对比(如EN 13795要求≤20 CFU/cm²)。?
3. 数据追溯：完整记录试验日期、操作人员、设备编号、压力曲线截图、菌落照片等信息，建立电子档案备查。?
五、日常维护要点?
气路维护：每周检查硅胶管老化程度，每月校准压力传感器；?
灭菌管理：每次试验前后用75%乙醇擦拭气路接口，季度性更换高效过滤器；?
性能验证：每年进行设备校验，重点核查压力控制精度(误差≤±3%)和气流均匀性(CV值<5%)。?
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